槲皮素-3-O-芹菜糖基蘆丁糖甙抗抑郁作用機制的研究.pdf

1、目的：研究抗抑郁劑槲皮素-3-O-芹菜糖基蘆丁糖甙(代號：CTN-986)，一種從棉籽中提取的新型黃酮類化合物的抗抑郁作用機制。 方法：(1)利用5-羥色胺酸(5-HTP)誘導的小鼠甩頭以及5-HT1A受體特異性激動劑8-OH-DPAT誘導的小鼠體溫下降模型，觀察CTN-986的抗抑郁作用及其可能作用環(huán)節(jié)。(2)運用免疫組織化學的方法，觀察CTN-986對慢性應激小鼠海馬齒狀回神經元再生以及腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)表達的影

2、響。(3)分離培養(yǎng)新生大鼠海馬神經前體細胞，運用免疫細胞化學的方法對所培養(yǎng)的細胞特性進行鑒定。用MTT法和3H-胸腺嘧啶核苷摻入法觀察CTN-986對新生大鼠海馬神經前體細胞增殖的影響，并初步探討其作用機制。 結果：(1)CTN-986可以增加5-HTP誘導的小鼠甩頭次數(shù)，進一步提示CTN-986具有明確的抗抑郁活性，并且該活性與增強5-HT神經功能有關；同8-OH-DPAT一致，CTN-986可以顯著地降低小鼠體溫，而5-HT

3、1A受體特異性拮抗劑WAY-100635可以明顯減弱此降溫作用，提示CTN-986抗抑郁作用的發(fā)揮與激活5-HT1A受體關系密切。(2)慢性應激21d的大鼠海馬齒狀回中BrdU標記的新生神經細胞數(shù)目明顯減低，BDNF的表達水平也明顯降低，如同時給予丙咪嗪或CTN-986可以顯著增加BrdU標記的新生神經細胞數(shù)目，提高BDNF的表達水平，并且BrdU標記的新生細胞21d后部分可以表達成熟神經元的標志神經元特異性烯醇化酶(NSE)。(3)所

4、培養(yǎng)的細胞呈球狀生長，免疫組化鑒定結果表明，此神經球可以表達未分化神經細胞的主要標志神經上皮干細胞蛋白(Nestin)，可以摻入外源性給予的細胞增殖特異性標記物之一溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)；在體外，我們所培養(yǎng)的細胞可以增殖，表皮生長因子(EGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)合用時，可以顯著地促進細胞增殖；將EGF、bFGF從神經前體細胞生長培養(yǎng)基中撤除，神經前體細胞可以被誘導分化，分化后的細胞可以表達NSE或成熟星形膠質細胞

5、特異性標志—膠質纖維酸性蛋白(GFAP)。這些結果提示，我們所培養(yǎng)的細胞具有神經前體細胞的特性。藥物研究發(fā)現(xiàn)，氟西汀(1-2μM)和CTN-986(2-250μM)作用4d，可以顯著促進神經前體細胞的增殖；而同時給予WAY-100635(0.1μM)可以拮抗CTN-986誘導的神經前體細胞的增殖作用。在PC12細胞上也得到了同樣的結果。 結論：CTN-986在經典的抗抑郁動物模型中具有明確的抗抑郁活性，其抗抑郁作用可能與以下機制