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文檔簡介
1、目的:
探討甘精胰島素、地特胰島素及人胰島素對體外3T3-LI脂肪細(xì)胞PPARγ2mRNA表達(dá)的影響及可能機(jī)制。
方法:
1.體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞,分組誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化為成熟脂肪細(xì)胞。根據(jù)誘導(dǎo)液含有不同胰島素將細(xì)胞隨機(jī)分成4組:甘精胰島素(注射液)組、甘精胰島素(純品)組、地特胰島素(注射液)組、人胰島素(純品)組;按照每大組所含胰島素濃度不同(100、500、1000n
2、mol/L)分別分為3小組。另設(shè)10nnmol/L人胰島素作為對照組。培養(yǎng)十天至脂肪細(xì)胞成熟。各組樣本量為3,重復(fù)3次。
2.提取細(xì)胞內(nèi)總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,用實時定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法檢測細(xì)胞內(nèi)PPARγ2mRNA的相對表達(dá)水平。
3.全部數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((-X)-S)表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,多組定量資料間比較采用單因素方差分析,兩兩之間比較采用LSD-t檢驗。
3、檢驗水準(zhǔn)取α=0.05。P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1.不同胰島素對3T3-L1脂肪細(xì)胞PPARγ2mRNA表達(dá)的影響:隨著甘精胰島素、地特胰島素、人胰島素濃度的升高,每組PPARγ2mRNA表達(dá)均逐漸升高,表明1000nmol/L胰島素組促進(jìn)細(xì)胞分化的作用強(qiáng)于500nmol/L,而100nmol/L組促進(jìn)細(xì)胞分化的作用最弱。以上差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
2.同一
4、濃度下不同胰島素對3T3-L1脂肪細(xì)胞PPARγ2mRNA表達(dá)的影響:分別用100nmol/L、500nmol/L、1000nmol/L三種濃度誘導(dǎo)至細(xì)胞成熟,其結(jié)果均為人胰島素(純品)組促進(jìn)PPARγ2mRNA表達(dá)強(qiáng)于甘精胰島素(純品與注射液)組,而地特胰島素(純品)組最弱。以上的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。甘精注射液組與甘精純品組比較無明顯差別。
結(jié)論:
1.甘精胰島素、地特胰島素、人胰島素誘導(dǎo)
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