雙泛素蛋白FAT10在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2009級碩士學(xué)位論文雙泛素蛋白FATIO在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制的初步探討PreliminaryStudyontheFunctionandRegulationMachanismofFATl0inHepatocellularCarcinomaOccurrenceandProgression課題來源：國家自然科學(xué)基金(81172056)專業(yè)名稱學(xué)位申請人指導(dǎo)教師答辯委員會主席答辯委員會成員腫瘤放射治療學(xué)董忠誼吳德華副

2、教授莊承海教授廖旺軍主任醫(yī)師陳應(yīng)瑞教授陳永清副教授閆衛(wèi)平副教授論文評閱人陳龍華教授商誼教授2011年5月18日廣州摘要類疾病(尤其是腫瘤)的發(fā)生及發(fā)展中扮演了重要角色。研究發(fā)現(xiàn)FATl0在多種腫瘤中高表達(dá)，如肝癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、卵巢癌等，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。而其中FATl0與肝癌的關(guān)系最為密切。在肝癌發(fā)生研究中，經(jīng)過如藥物DDC(3，5diethoxcarbonyl14一dihydroeollidine)、灰黃霉素、狄

3、氏劑等處理后的小鼠肝臟細(xì)胞中會出現(xiàn)MalloryDenkBodies(MDBs)，隨后觀察到這些小鼠肝臟發(fā)生了腫瘤，提示MDBs的形成是一種癌前病變。對這些用藥物預(yù)處理后的小鼠肝臟進(jìn)行基因表達(dá)譜分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)許多癌基因的表達(dá)上調(diào)，而其中表達(dá)上調(diào)最高的則是FATl0基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ATlO表達(dá)陽性的肝細(xì)胞在停藥后4個月中仍然持續(xù)過表達(dá)，停藥8個月后在FATl0過表達(dá)的部分肝臟組織中發(fā)生了腫瘤，提示FATl0與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。然

4、而，到目前為止很少有研究探討FATl0在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其參與肝癌形成的具體機(jī)制。本文通過從基因和蛋白水平研究肝癌組織及癌旁組織中FATl0表達(dá)情況進(jìn)而分析其對肝癌患者預(yù)后及術(shù)后復(fù)發(fā)的影響。進(jìn)一步通過基因過表達(dá)及干擾手段探討FATl0對肝癌細(xì)胞增殖、侵襲及上皮一問充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)等生物學(xué)過程的影響及其相關(guān)機(jī)制，闡明了FATIO在肝癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，為判斷肝癌預(yù)后及分子靶向治療奠定了理論基礎(chǔ)。方法1、FATl0在肝癌及癌旁組織

5、中表達(dá)情況及臨床意義利用RealTimePCR方法檢測30對肝癌組織及癌旁組織中FATl0mRNA的表達(dá)水平，同時利用weStemblot方法檢測8對肝癌癌旁配對組織中FATl0蛋白表達(dá)水平。進(jìn)一步通過免疫組化方法檢測FATl0在212例肝癌患者石蠟切片中的表達(dá)情況。為了證實(shí)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們通過組織芯片技術(shù)進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，檢測278例肝癌、30例正常肝及50例肝炎肝硬化組織中FATl0表達(dá)水平。采用MannWhitneyU一檢驗(yàn)方法