CBX8在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　為了明確HCC患者癌及癌旁組織中CBX8蛋白的表達(dá)，分析其表達(dá)與HCC患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，并通過檢測(cè)CBX8對(duì)體內(nèi)外肝癌細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響，闡明CBX8在HCC發(fā)生發(fā)展中的作用及其分子機(jī)制。方法：采用組免疫組化、Western blot檢測(cè)HCC癌及癌旁組織中CBX8蛋白的表達(dá)，分析其表達(dá)與HCC患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系；采用shRNA干擾技術(shù)在肝癌細(xì)胞中敲低CBX8的表達(dá)，運(yùn)用CCK-8、劃痕、Tr

2、answell、平板克隆等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞生物學(xué)特性改變，Western blot及免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)敲低CBX8表達(dá)后肝癌細(xì)胞EMT標(biāo)志物改變，裸鼠實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步明確CBX8對(duì)肝癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤及EMT的影響。
　　結(jié)果：
　?。?）CBX8在HCC患者癌組織中表達(dá)較癌旁組織高，CBX8表達(dá)與患者飲酒、HCC家族史、HBV感染、腫瘤直徑、有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及腫瘤病理分級(jí)相關(guān)，CBX8高表達(dá)提示 HCC患者預(yù)后不良。
　?。?

3、）在CBX8高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、SK-Hep-1中敲低CBX8的表達(dá)后，細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力降低，細(xì)胞凋亡增加，CBX8可促進(jìn)肝癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤及EMT。
　?。?）在CBX8高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株SMMC-7721、SK-Hep-1中敲低 CBX8的表達(dá)后，Western blot及免疫熒光檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞上皮標(biāo)志物（E-cadherin、β-catenin）表達(dá)增加，間質(zhì)標(biāo)志物（N-cadherin、Vi

4、mentin）表達(dá)降低，提示CBX8誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生EMT。
　?。?）CBX8通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路誘導(dǎo)肝癌發(fā)生EMT，通過ITGA5、ITGA2及其下游PXN影響腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移，通過P53/p21/SERPINE1信號(hào)通路影響腫瘤細(xì)胞增殖及血管形成，最終促進(jìn) HCC侵襲和向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。
　　結(jié)論：
　?。?）CBX8在HCC中高表達(dá)并與HCC患者腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后不良相關(guān)。
　?。?）CBX