廣西副豬嗜血桿菌分子流行病學(xué)調(diào)查及其病原的分離和生物學(xué)特性研究.pdf

1、副豬嗜血桿菌(HPs)引發(fā)一種以多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎、腦膜炎及高死亡率為特征的傳染病，嚴(yán)重的危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究從廣西9個(gè)地區(qū)(市)26個(gè)地縣各豬場采集了235份材料，進(jìn)行了HPs的分子流行病學(xué)和細(xì)菌的分離鑒定等方面的研究。其研究主要結(jié)果如下： 1、HPs的分子流行病學(xué)調(diào)查2006年11月至2008年2月，從廣西9個(gè)市26個(gè)地區(qū)采集到235份病料，根據(jù)HPs 16S rRNA序列設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果得出14株陽性

2、病料，陽性率為5.96％。分別是南寧市郊4份，武鳴1份，上林1份，陸川3份，興業(yè)1份，新興2份，天等1份。該結(jié)果表明HPs已經(jīng)在廣西發(fā)生，但并未形成廣泛流行。 2、廣西HPs 16S rRNA的克隆與序列分析試驗(yàn)將822 bp擴(kuò)增片段連入T-載體后測序，再與GenBank中的序列進(jìn)行比對。14份陽性材料同國外發(fā)表的序列進(jìn)行同源性分析，結(jié)果表明同源性為94.3％～99.8％，14個(gè)廣西株之間核苷酸同源性為94.5％～100％。這說

3、明廣西菌株之間及其與國外菌株之間的變異不大。 3、HPs的分離和生物學(xué)特性研究 (1)HPs的分離。從14株P(guān)CR檢測為陽性的材料中，分離出7株菌株，分別是GXNN3、GXNNST1、GXNNWM1、GXLZXX1、GXLZXX2、GXLZ1、GXYLLC1。經(jīng)鏡檢、生化試驗(yàn)等，表明其菌落特征、細(xì)菌形態(tài)及對各種生化試劑的反應(yīng)結(jié)果與HPs特征相符，再經(jīng)PCR方法確定為HPs。 (2)藥敏試驗(yàn)。將分離到的7株陽性菌株

4、進(jìn)行藥敏試驗(yàn)確定其對藥物的敏感性。結(jié)果7株分離細(xì)菌對各種藥物大多呈現(xiàn)不同的敏感性。其中敏感性較高的為頭孢拉定和恩諾沙星，其次是先鋒V和氧氟沙星。據(jù)此結(jié)果，在廣西3個(gè)豬場應(yīng)用于臨床后，成功的控制了本病。說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床應(yīng)用結(jié)果基本符合，為治療本病提供了寶貴的經(jīng)驗(yàn)。 (3)分離株的毒力測定。取健康小白鼠，用純化的病原菌制成細(xì)菌懸液，腹腔注射0.5ml，觀察小鼠情況，以測定分離株的毒力。結(jié)果GXLZXX2、GXLZ1的毒力最強(qiáng)，GX