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1、從我國(guó)西藏那曲地區(qū)采集的土壤標(biāo)本中分離獲得一株對(duì)水稻稻瘟病菌具有很高拮抗活性的放線菌TAS-1菌株,根據(jù)其形態(tài)、培養(yǎng)和生理生化特征,鑒定為灰色鏈霉菌(Streptomyces grisuS Wakman & Henrici)。 該菌株在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的pH值和溫度范圍分別為4.0~11.5和7℃~50℃,最適生長(zhǎng)pH值為8.0,溫度為29℃,能利用多種碳源。 放線菌TAS-1菌株對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制機(jī)制之一是產(chǎn)生拮抗
2、物質(zhì)。該菌株在發(fā)酵培養(yǎng)液(葡萄糖10g,酵母浸汁7.5g,蒸餾水1000mL,pH7.2)中28℃下靜止培養(yǎng)10d可產(chǎn)生對(duì)水稻稻瘟病菌有拮抗作用的的拮抗物質(zhì),而在同等條件下振蕩培養(yǎng)則不產(chǎn)生對(duì)水稻稻瘟病菌有拮抗作用的拮抗物質(zhì)。 用氯仿可以提取該菌株產(chǎn)生的拮抗物質(zhì),最佳提取條件為:有機(jī)溶劑與發(fā)酵上清液體積(v/v)比為1:2時(shí)其提取液對(duì)水稻稻瘟病菌的平均抑菌率可達(dá)55.6%。 放線菌TAS-1菌株產(chǎn)生拮抗物質(zhì)隨不同的培養(yǎng)基和
3、培養(yǎng)條件而變化。在供試的16種培養(yǎng)液中,1號(hào)培養(yǎng)液(乳糖15g,葡萄糖15g,黃豆粉25g,酵母膏5g,氯化鈉20g,蒸餾水1000mL,pH7.2)產(chǎn)生的拮抗物質(zhì)對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制作用最強(qiáng),其培養(yǎng)上清液對(duì)水稻稻瘟病菌的平均抑菌率高達(dá)73.34%。該菌株在1號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)21d、培養(yǎng)基pH值為8.0、培養(yǎng)溫度為29℃、500mL三角瓶中盛90mL培養(yǎng)液時(shí)對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制作用最強(qiáng)。 放線菌TAs-1菌株發(fā)酵上清液有較廣的抗菌
4、譜。供試的15種病原真菌中,除對(duì)玉米串珠鐮孢菌(Fusarium moniliforme SheId.)和茉莉白絹病菌(Sclerotium rofsii Sacc.)無(wú)抑制作用外,對(duì)水稻稻瘟病菌(Pyricularia grisea(Cooke)Sacc.)、玉米大斑病菌(Exerohilumturcicum(Pass.)Lenonard & Suggs)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis(Nishik & Miyabe
5、)shoem.)、茉莉擬莖點(diǎn)霉菌(Phomopsis sp.)、白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae(Berk.)Sacc.)、芥菜黑斑病菌(Aiternaria brassicicola(Schw.)Wiltsguire)、香蕉新月彎孢菌(Curvularia lunata(walker)Boedijin)、香蕉鏈格孢菌(Airernariamusae Bout.et Bat)、苦瓜鏈格孢菌(AIternaria c
6、ucumetina(Ell.et.EV.)Elliott)、八角炭疽病菌(Colletotrichum coccdes(Wall)Hughes和Colletotrichum sp.)(圓形和鐮刀形兩種)、柑橘炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.)、楊桃炭疽病菌(CoIletotrichum Eloeosporioides(Penz.)Sacc.)、番茄灰霉病菌(Botrytis
7、cinerea Per.)、草莓輪斑病菌(Phomopsis obscuras(Ell.etEV.)Sutton)均有較好的抑制作用。 放線菌TAS-1菌株接種到水稻葉片上,在接種O d至第3 d,菌量從3.51×10<'6>孢子/cm<'2>。下降到O.035×10<'6>孢子/cm<'2>,在第3 d至第9 d,菌量從0.035×10<'6>孢子/cm<'2>上升到2.1 3 X 1 0<'5>孢子/cm<'2>,在第9
8、d至第18 d,菌量從2.1 3 X 1 0<'6>孢子/cm<'2>下降至0孢子/cm<'2>。 盆栽測(cè)定放線菌TAs-1菌株對(duì)水稻稻瘟病的防治效果,先接種放線菌TAS-1菌株孢子懸浮液2 d后接種水稻稻瘟病菌的植株對(duì)水稻稻瘟病有很好的防治效果,防效達(dá)70.36[%],先接種水稻稻瘟病菌2 d后接種放線菌TAS-1菌株孢子懸浮液的植株對(duì)水稻稻瘟病的防效較低,防效僅47.96[%]。 放線菌TAs-1菌株孢子懸浮液和該菌
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