抗稻瘟病水稻內(nèi)生放線菌的篩選鑒定及生物活性的研究.pdf

1、水稻稻瘟病是世界上傳播最為廣泛且危害最大的水稻疾病之一，但由于稻瘟病病原菌具有遺傳復(fù)雜、致病多樣和極易變異等特點，使得水稻抗病品種及化學(xué)農(nóng)藥經(jīng)常在數(shù)年內(nèi)失效，因此稻瘟病的生物防治日益受到重視。內(nèi)生菌是是植物微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，它能夠在植物體內(nèi)存活而不對寄主植物具有明顯危害。內(nèi)生放線菌可產(chǎn)生豐富多樣的生物活性物質(zhì)，發(fā)揮促進(jìn)植物生長、抗逆境、抗病蟲害等作用。因此，內(nèi)生放線菌作為一種天然防治稻瘟病的潛在資源值得開發(fā)利用。本論文為了尋找新

2、的防治稻瘟病的生物防治菌，從湖南本地生長的水稻中篩選具有抗稻瘟病潛力的內(nèi)生放線菌并開展相關(guān)性能研究。
　　1.選取了稻瘟病易感品種秈稻湘矮早7號和相應(yīng)的具有廣譜抗稻瘟性的谷梅4號為研究材料。在水稻生長至2周、4周、7周、11周、16周、19周左右時，對未感和已感稻瘟病的湘矮早7號、谷梅4號的水稻材料進(jìn)行了內(nèi)生菌分離。2012年水稻分離結(jié)果顯示，處于營養(yǎng)生長期的水稻中分離的內(nèi)生菌數(shù)量明顯比并進(jìn)期、生殖生長期水稻內(nèi)生菌數(shù)量多;未感水稻

3、中分離的內(nèi)生菌比已感水稻分離的多，其中從2周、4周未感水稻中分離的233株內(nèi)生菌占全部時期分離總量的55％。
　　2.選取2012年4周水稻材料中分離的171株內(nèi)生菌進(jìn)行抗稻瘟病菌的篩選實驗，結(jié)果得到5株較好拮抗菌Sh-1、Sh-2、Sh-3、Sh-4、Sh-5，都來自未感病水稻。利用5種不同生理小種的稻瘟病菌進(jìn)行復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)菌Sh-2的各項拮抗能力最突出。菌株在28℃、PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下能有效抑制稻瘟病菌的生長;在ISPⅡ液體

4、培養(yǎng)基中，28℃、150r/min轉(zhuǎn)速震蕩培養(yǎng)7天的菌液，在混合有稻瘟病菌孢子的PDA培養(yǎng)基中有明顯的抑制稻瘟病生長的抑菌圈出現(xiàn);鑒定其屬于鏈霉菌屬（Streptomyces）中的吸水鏈霉菌（hygroscopicus），命名為OsiSh-2。
　　3.針對OsiSh-2拮抗稻瘟病能力，對其產(chǎn)生的生物活性物質(zhì)做了進(jìn)一步研究。發(fā)現(xiàn)OsiSh-2能夠分泌起降解真菌細(xì)胞壁作用的幾丁質(zhì)酶、纖維素酶及能對真菌產(chǎn)生鐵元素競爭性抑制的鐵載體;在