鉛鋅尾礦抗重金屬放線菌的分離篩選鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、從采集自甘肅徽縣鉛鋅尾礦區(qū)土樣中,分離篩選得到對重金屬鉛具有抗性的放線菌菌株202株,對重金屬鋅具有抗性的放線菌菌株108株。通過液體復(fù)篩最終得到1株鉛的最低抑制濃度(MIC)為4.0mM的放線菌菌株CCNWHX13-160T和1株對鋅的最低抑制濃度(MIC)達(dá)到11.42mM的放線菌菌株CCNWHX72-14。 重金屬吸附研究結(jié)果表明:當(dāng)液體培養(yǎng)基中重金屬鉛濃度為1mM時菌株CCNWHX13—160對鉛的吸附率達(dá)到94.46%

2、,當(dāng)液體培養(yǎng)基中重金屬鋅濃度為2mM時菌株CCNWHX72-14對鋅的吸附率為87.22%。 菌株CCNWHX13-160和CCNWHX72-14的多相分類及系統(tǒng)發(fā)育研究結(jié)果表明:菌株CCNWHX13-160和CCNWHX72-14孢子鏈柔曲或螺旋,孢子表面光滑或褶皺,氣生菌絲,基內(nèi)菌絲分枝發(fā)達(dá)、無橫隔、不斷裂,與鏈霉菌屬形態(tài)特征相似。根據(jù)基絲、氣絲和可溶性色素的特征將菌株CCNWHX13-160T和CCNWHX72-14分別初

3、步歸為屬于灰褐類群和白孢類群。菌株CCNWHX13-160T細(xì)胞壁含L,L-DAP,甘氨酸,細(xì)胞壁類型Ⅰ(cell-wall typeⅠ)。全細(xì)胞水解液主要糖為Arabinose,Galactose及少量Glucose,全細(xì)胞糖類型A。磷酸類脂類型為PⅡ型(phospholipid type Ⅱ)。甲基萘醌類型為[MK-9(H6,H8和H4)],符合鏈霉菌屬甲基萘醌類型。脂肪酸主要由直鏈飽和、不飽和及甲基分枝脂肪酸等要由14、15、16

4、、17碳的飽和、異式(iso-)、反異式(anteiso-)構(gòu)型脂肪酸構(gòu)成,其種類與含量和大多數(shù)鏈霉菌脂肪酸的構(gòu)成相符合。 16S rDNA序列相似性分析表明:菌株 CCNWHX72-14與模式株Streptomycesciscaucasicus DSM 40275(AY508512)兩者相似性達(dá)到98.7%,構(gòu)成一個小的系統(tǒng)發(fā)育分支。菌株CCNWHX13-160T與鏈霉菌屬已有效發(fā)表種Streptomyces pseudove

5、nezuelae NBRC 12904 (AB184233) 和Streptomyces resistomycificus NBRC 12814相似性最高分別為98.9%和98.8%,且從系統(tǒng)發(fā)育樹狀圖中可以明顯的看出菌株CCNWHX13-160T與Streptomyces pseudovenezuelae NBRC 12904(AB184233)形成了一個特殊的系統(tǒng)發(fā)育分支。菌株CCNWHX13-160T和與其16S rDNA相似性最

6、高的模式株S.pseudovenezuelae NBRC 12904和S.resistomycificus NBRC12814生理生化特征研究結(jié)果表明它們之間存在著普遍而明顯的差異。 DNA-DNA同源性分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:CCNWHX13-160與Streptomycespseudovenezuelae NBRC 12904和Streptomyces resistomycificus NBRC 12814的DNA同源性分別為48

7、.7%和43.2%。菌株CCNWHX13-160T的G+Cmol%值為70.9 mol%。 形態(tài)學(xué)特征、生理生化特性、化學(xué)分類結(jié)果、16S rDNA全序列比較及系統(tǒng)發(fā)育分析和DNA同源性分析及DNA堿基組成(G+C mol%)分析等多相分類研究結(jié)果表明,菌株CCNWHX13-160T屬于鏈霉菌屬,但與該屬已發(fā)表有效種的表型特征和基因特征存在明顯差異,應(yīng)視為鏈霉菌屬一個新發(fā)現(xiàn)種,暫命名為抗鉛鏈霉菌Streptomyces resi

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