鳳縣野生植物內(nèi)生放線菌的分離篩選及鑒定.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)有效的分離方法從鳳縣的野生植物中分離獲得15株內(nèi)生放線菌，篩選得到Am3和Am5兩株高活性的內(nèi)生菌株，優(yōu)化其搖瓶發(fā)酵條件，并對(duì)兩株菌的溫室防病促生效果及分類鑒定進(jìn)行研究，希望為新型生防菌的開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。本論文主要包括以下幾部分： 1.內(nèi)生放線菌的獲得及其在非寄主作物上的定殖能力測(cè)定。用選擇性培養(yǎng)基從鳳縣地區(qū)的13種野生植物中分離獲得15種放線菌，非寄主作物定殖試驗(yàn)表明分離所獲放線菌不僅能夠定殖在不同植物體內(nèi)，而且能

2、定殖在植物的不同部位，具有強(qiáng)內(nèi)生性。 2.內(nèi)生放線菌離體抑菌活性測(cè)定。通過(guò)皿內(nèi)拮抗試驗(yàn)確定分離獲得的15株放線菌中Am3和．Am5兩株菌對(duì)5種供試靶標(biāo)真菌(灰葡萄孢Botrytis cinema、膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、尖鐮孢萎蔫?；虵usarium oxysporum f.sp.vasinfectum、梨狀毛霉菌．Mucor Pirirormis和粉紅聚端孢Trichothec

3、ium roseum)有明顯拮抗活性，其中Am3對(duì)狄葡萄孢菌抑制率達(dá)89.0％，Am5和對(duì)西瓜枯萎病菌抑制率達(dá)71.0％；發(fā)酵液抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Am3、Am5兩株菌的發(fā)酵液對(duì)供試靶標(biāo)真菌均有明顯抑制作用，菌體殘?jiān)崛∥锏霓卓够钚悦黠@高于發(fā)酵慮液提取物。 3.內(nèi)生放線菌溫室防病病促生作用測(cè)定。溫室番茄、黃瓜防病促生實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示菌株Am3、Am5能有效防治溫室黃瓜白粉病和番茄葉霉病，促進(jìn)植株生長(zhǎng)，其中經(jīng)Am3處理過(guò)的番茄植株干重比對(duì)

4、照植株干重增加120％，對(duì)番茄狄霉病的防效達(dá)74.4％。 4.菌株發(fā)酵條件優(yōu)化。對(duì)Am3和Am5兩株菌搖瓶發(fā)酵條件進(jìn)行初步優(yōu)化，通過(guò)考察碳源、有機(jī)氮源、無(wú)機(jī)氮源、磷酸鹽等無(wú)機(jī)離子對(duì)兩株菌發(fā)酵的影響，確定兩株菌最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為改良高氏培養(yǎng)基。菌株Am3發(fā)酵液最佳初始pH值為7.5，最佳培養(yǎng)時(shí)間為120h，最佳培養(yǎng)溫度為26℃；菌株．Am5發(fā)酵液最佳初始pH值為7.0，最佳培養(yǎng)時(shí)間為132h，最佳培養(yǎng)溫度為25℃ 5.菌株鑒