兩種植物內(nèi)生和根際放線菌抑菌活性研究及Spirillospora tritici新種鑒定.pdf

1、放線菌不僅是土壤生態(tài)系統(tǒng)中主要的組成部分，也是各種藥用價值天然產(chǎn)物的重要來源。受植物生長和根部微生物的影響，植物根內(nèi)、根際放線菌的種類比較多樣、功能比較復(fù)雜。植物根內(nèi)和根際放線菌不僅能在植物受到病原菌侵襲時協(xié)助植物免受病原體的侵染，也能通過產(chǎn)生生物活性物質(zhì)來幫助植物抵抗病害。從放線菌中獲得新型活性化合物或者尋找合適的微生物菌劑，來幫助植物抵抗病蟲害，從而提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，是新世紀(jì)人們所關(guān)注的一個熱點問題。基于植物根內(nèi)和根際放線菌的

2、特殊性，許多研究人員開始將其作為活性放線菌的分離源。本研究首次選用傳統(tǒng)藥用植物半夏和感條銹小麥品種taichun29為實驗材料，探索了這兩種植物根內(nèi)和根際放線菌的資源，旨在發(fā)現(xiàn)新型生物活性物質(zhì)和新種放線菌。
　　本實驗選用5種分離培養(yǎng)基，分離純化出了168株放線菌。在藥用植物半夏的根內(nèi)和根際分別分離出33株和64株放線菌;在感條銹小麥品種taichun29的根內(nèi)和根際分別分離出17株和54株放線菌。利用1種病原細(xì)菌和13種病原真菌

3、作為靶標(biāo)菌來研究這些放線菌的活性，結(jié)果表明有23株放線菌具有生物活性的。其中17株至少能抑制3種病原菌的生長，10株至少能抑制5種病原菌的生長，6株至少能抑制10種以上病原菌的生長，發(fā)現(xiàn)有4株菌分別對蘋果輪斑菌、柑橘痂圓孢菌、核盤菌和尖孢鐮刀菌黃瓜專化型抑菌直徑達(dá)18mm以上，有1株菌不僅對12種病原菌都有抑制作用外對其中的六種病原菌產(chǎn)生的抑菌直徑超過20mm。此外，還有1株放線菌BXT54均能抑制這14種病原菌的生長，通過篩選確定了兩

4、種適合BXT54發(fā)酵的液體培養(yǎng)基（Medium2和PTM），并探究了其發(fā)酵產(chǎn)生活性化合物的穩(wěn)定性，結(jié)果表明此活性物質(zhì)具有一定的耐高溫和耐酸堿的能力。這為接下來代謝產(chǎn)物分離純化及化合物結(jié)構(gòu)鑒定提供了理論依據(jù)。
　　通過觀察分離得到的菌株在培養(yǎng)基上生長的形態(tài)特征，并結(jié)合菌株16S rRNA在EzBioCloud網(wǎng)站上序列比對分析的結(jié)果，確定對菌株SJ21進(jìn)行多相分類學(xué)鑒定?；?6S rRNA基因的系統(tǒng)發(fā)育分析和形態(tài)學(xué)特征比較，推斷菌

5、株SJ21屬于螺孢菌屬（Spirillospora）。與SJ21相似度最高的菌株是Spirillospora albida IFO12248T(98.75％，16S rRNA序列的相似度)，其次是Actinomadura montaniterrae JCM16995T(98.68％)、Actinomadura fibrosa ATCC49459T(98.53％)和Actinomadura nitritigenes DSM44137T(9