白蟻腸道細菌的多樣性和生物活性研究.pdf

1、白蟻腸道是一個比較封閉的微環(huán)境，白蟻腸道內(nèi)的共生微生物也具有其獨特的性質(zhì)，它們可以幫助白蟻分解難消化的木質(zhì)纖維素，產(chǎn)生白蟻生長所必需的刺激代謝產(chǎn)物等。本研究從白蟻腸道內(nèi)微生物的多樣性出發(fā)，利用免培養(yǎng)的高通量測序技術(shù)和純培養(yǎng)的方法研究白蟻腸道細菌的多樣性，篩選具有木質(zhì)纖維素分解能力和抗菌活性的菌株。為以后的研究提供一定的實驗依據(jù)。
　　本研究通過高通量測序技術(shù)，對白蟻腸道樣品中的細菌進行16SrDNA基因的V4區(qū)進行測序，最終獲得6

2、2404條有效的序列，總共630個OTUs。鑒定出厚壁菌門（Firmicutes）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）、螺旋體門（Spirochaetes）等13個門的細菌，其中放線菌門占16.95％。
　　本研究通過不同的培養(yǎng)基和分離方法分離白蟻腸道內(nèi)的微生物。一共挑取1458株菌，最后得到放線菌327株，其中包括一個放線菌目（Actinob

3、acterales），放線菌目下的5個亞目，分別為：微球菌亞目（Micrococcineae）的4個科；鏈霉菌亞目（Streptomycineae）的1個科；棒桿菌亞目（Corynebacterineae）的2個科；丙酸桿菌亞目（ Propionibacterineae）的1個科；小單孢菌亞目（Micromonosporineae）的1個科，總共有10個科，18個屬。并且分離到一株新分類單元，通過初步分析，鑒定YIM110061為明串珠

4、菌科（Leuconostocaceae）下的一個新屬。
　　本研究對分離得到的菌株篩選長勢良好的菌株進行纖維素酶活和木質(zhì)素酶活的測定。最終測量四株菌株的纖維素酶活隨時間的變化曲線，比較發(fā)現(xiàn) YIM110167分解纖維素的活性整體最好，并在第五天酶活達到最大值為23.69/ml。本研究測量菌株的三種木質(zhì)素酶活，分別是：漆酶、過氧化物酶、猛過氧化物酶。其中發(fā)現(xiàn)YIM110063的過氧化物酶活性最高，這株菌株還檢測到其他兩種酶的活性，后