21135.兩種木食性白蟻腸道內(nèi)共生細菌多樣性的比較研究

1、⑨碩士學位論文MASTER’STHESISComparativestudiesonthediversityofintestinalsymbioticbacteriabetweentwodifferentwood—feedingtermitesATheSiSSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementF0rtheMSDegreeinBiologyByChenJuanPostgraduatePr

2、ogramCollegeofLifeSciencesCentralChinaNormalUniversitySupervisor：YangHongAcademicTitle：AssociateProfessorSignatureMay2011⑧碩士學位論文MASTER’STHESIS摘要木食性白蟻作為自然界木質(zhì)纖維素的高效降解者，在能源日益缺乏的當今世界受到了科學界的廣泛關(guān)注。木食性白蟻腸道中棲息著眾多的共生微生物，這些微生物與白蟻的共

3、生關(guān)系與共生機制長期以來一直是人們非常感興趣的課題，對其共生關(guān)系的研究和探討對深入了解木食性白蟻降解纖維素的機制，開發(fā)與利用有益的微生物資源于新型的生物質(zhì)能源產(chǎn)業(yè)具有積極的意義。本文分別以黑胸散白蟻(ReticulitermeschinensisSnyder)和象白蟻Nasutitermessp為對象研究了一種低等木食性白蟻和一種高等木食性白蟻腸道內(nèi)共生細菌的多樣性，并對結(jié)果進行了比較與分析，為進一步探討共生細菌在不同類群木食性白蟻腸道

4、中的作用與功能，闡明白蟻降解纖維素的機制奠定了基礎。主要研究結(jié)果如下：1以象白蟻Nasutitermessp全腸DNA為模板，細菌16SrRNA基因的通用引物為引物擴增并構(gòu)建了象白蟻腸道內(nèi)共生細菌的16SrRNA基因文庫。從隨機挑取的419個克隆中得到73個細菌16SrRNA基因。對這些共生細菌16SrDNA的系統(tǒng)發(fā)育分析表明，象白蟻腸道內(nèi)共生細菌主要有螺旋體(658％)、嗜纖維桿菌(165％)、擬桿菌(45％)這幾大類，另外還包括一些

5、浮霉菌，厚壁菌以及一些不能確認門類的非培養(yǎng)細菌。2以黑胸散白蟻全腸DNA為模板，細菌16SrRNA基因的通用引物為引物擴增并構(gòu)建了黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細菌的16SrRNA基因文庫。從隨機挑取的602個克隆中得到150個細菌16SrRNA基因。對這些共生細菌16SrDNA的系統(tǒng)發(fā)育分析表明，黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細菌主要類群有螺旋體(423％)、白蟻菌群l(193％)、變形菌(106％)、厚壁菌(71％)和擬桿菌(68％)，此外，還包括一些

6、浮霉菌和放線細菌。3對黑胸散白蟻腸道內(nèi)的好氧及兼性厭氧菌進行了MPN的測定，結(jié)果表明該白蟻腸道內(nèi)好氧與兼性厭氧細菌的數(shù)量是925105每條?！?對兩個細菌16SrRNA基因文庫克隆的Rarefaction分析表明，從兩個文庫所選的克隆數(shù)都能夠較好地覆蓋細菌的多樣性。本研究的結(jié)果表明，象白蟻與黑胸散白蟻腸道內(nèi)共生細菌的多樣性與種群結(jié)構(gòu)有明顯的差異，推測這種差異與白蟻腸道內(nèi)鞭毛蟲的有無、消化道生理條件以及白蟻的代謝需要等生物學特性相關(guān)。關(guān)鍵