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文檔簡介
1、腸埃希氏菌Escherichia coli在正常情況下是人腸道中的共生細菌,但當機體免疫力降低時,或者當其移位至其它組織、器官時,E.coli能夠引起疾病,屬于機會性致病菌?,F(xiàn)在普遍認為腸道菌群的結(jié)構(gòu)與功能同代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展有著重要的關(guān)聯(lián),而機會性致病菌可能是疾病發(fā)生的原因之一。來自本實驗室費娜博士的研究發(fā)現(xiàn)一株分離自重度肥胖患者腸道內(nèi)的機會性致病菌陰溝腸桿菌 Enterobacter cloacae B29在高脂飲食的誘導下能夠引
2、起無菌小鼠肥胖和胰島素抵抗,說明機會性致病菌可能是肥胖和胰島素抵抗發(fā)生的原因。由于屬于同一種群的不同細菌生物學功能不同,因此,探究腸道中機會性致病菌在菌株水平的微多樣性和體外生物活性,為以腸道菌群為靶點診斷、治療和預(yù)防代謝性疾病的研究提供科學依據(jù)。
本研究利用選擇性培養(yǎng)基和ERIC-PCR指紋圖譜技術(shù),從一名重度肥胖患者腸道內(nèi)分離出19種不同 ERIC類型的分離物。經(jīng)過16S rRNA基因全長測序和生化反應(yīng)鑒定顯示19種分離物
3、均為變形菌門、γ-變形菌綱、腸桿菌目、腸桿菌科埃希氏菌屬的E.coli。選取19種分離物的代表菌株,進行體外生物活性分析。我們發(fā)現(xiàn),19株E.coli代表菌株在糖代謝、氨基酸代謝的能力上有明顯差異性,其中D4、D7、D28、D45、D51、D54、D80、D104、D133、E31具有代謝氨基酸產(chǎn)生尸胺腐胺的能力;毒性因子檢測結(jié)果表明 D54菌株含有致病性埃希氏菌 EPEC的eae毒力因子,具有潛在的致病性。藥敏試驗結(jié)果顯示,在該重度肥
4、胖患者長期未服用抗生素的情況下,19株E.coli代表菌株的整體耐藥性較弱,但是 D45、D54、D74、D104、D133、E4菌株具有多重耐藥性。
膽酸(cholic acid,CA)是人體肝臟分泌的膽汁酸中的主要成分。膽酸一方面可以促進人腸道中脂類物質(zhì)的消化吸收,另一方面,膽酸也作為信號分子參與調(diào)節(jié)機體的能量代謝。我們采用體外厭氧培養(yǎng)的方法研究19種 E.coli代表菌株同膽酸的相互作用。通過 UPLC-TOF-MS分析
5、發(fā)現(xiàn)19種 E.coli代表菌株中除了 D76和E4,其余17株E.coli都能通過脫氫、脫羥基反應(yīng)代謝膽酸產(chǎn)生脫氫膽酸和脫氧膽酸等次級膽酸,但17株 E.coli對膽酸的代謝程度有明顯差異。代謝產(chǎn)生的脫氫膽酸和脫氧膽酸疏水性增加,能更容易地進入腸壁細胞發(fā)揮效應(yīng)。
總之,本研究表明來自同一個體腸道內(nèi)的大腸埃希氏菌 E.coli在菌株水平上具有微多樣性,且不同菌株的生物活性存在顯著差異。E. coli在菌株水平上之所有具有如此豐
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