耐力訓(xùn)練和p53抑制劑對40周齡ICR小鼠骨骼肌自體吞噬相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、骨骼肌就像是人體運(yùn)動的代言人，為了創(chuàng)造和維持機(jī)械張力，肌肉細(xì)胞的組織呈現(xiàn)高度的結(jié)構(gòu)化。肌細(xì)胞內(nèi)每時每刻都在發(fā)生各種變化，其中包括一些在分解條件下的變化：蛋白質(zhì)被調(diào)動起來，線粒體和肌漿網(wǎng)重塑，肌細(xì)胞核消失等。日常的身體活動中，肌肉收縮可導(dǎo)致機(jī)械性的和代謝性的肌肉蛋白和細(xì)胞器的損害或改變。已有研究認(rèn)為，在衰老過程中分解代謝加強(qiáng)，機(jī)體發(fā)生一系列變化需要加強(qiáng)自體吞噬途徑對功能損害和廢除分子進(jìn)行清除，自體吞噬相關(guān)基因與骨骼肌衰老過程有緊密關(guān)系。體

2、育鍛煉能促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，有效延緩細(xì)胞衰老，減少細(xì)胞癌變機(jī)率，對自體吞噬這一過程可能有良性效應(yīng)。腫瘤抑制蛋白質(zhì)“基因衛(wèi)士”p53，參與自噬的調(diào)控，是細(xì)胞能量代謝，保持細(xì)胞氧化應(yīng)激信號穩(wěn)態(tài)，預(yù)防腫瘤和延緩衰老的策略之一。然而，骨骼肌自體吞噬，尤其是線粒體對具體運(yùn)動方式發(fā)生特異性自體吞噬途徑的基因表達(dá)機(jī)制還鮮為人知，與運(yùn)動敏感性基因表達(dá)有關(guān)的調(diào)控因子還知之甚少。
　　 目的：觀測4周耐力運(yùn)動和p53抑制劑對40周齡ICR小鼠骨骼肌自

3、體吞噬相關(guān)基因表達(dá)的影響，通過ICR小鼠p53/ARF和PUMA/BAX信號通路相關(guān)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄對自體吞噬和線粒體自體吞噬及氧化功能的控制作用的影響進(jìn)行研究，以期對線粒體衰老學(xué)說有新的認(rèn)識，并通過運(yùn)動干預(yù)對其的影響進(jìn)行新的探索。
　　 方法：將40只雄性ICR，40周齡，體重45±5g隨機(jī)分成對照組，Pifithrin-α組，Pifithrin-α耐力訓(xùn)練組，Pifithrin-μ組，Pifithrin-μ耐力訓(xùn)練每組8只。P

4、ifithrin-α耐力訓(xùn)練組和Pifithrin-μ耐力訓(xùn)練進(jìn)行4周跑臺訓(xùn)練，每周訓(xùn)練6天，每天一次，訓(xùn)練40分鐘。經(jīng)過飼養(yǎng)，末次運(yùn)動結(jié)束12-24h內(nèi)處死各組大鼠，用酶標(biāo)儀測GSH的活性和T-SOD的濃度進(jìn)行比較；Real-time PCR測定鼠腓腸肌p53mRNA、Bax mRNA、Beclin-1 mRNA、LC3 mRNA和Atg7mRNA水平進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：
　　 (1)實驗4周后P-α組、P-α訓(xùn)練

5、組、P-μ組、P-μ訓(xùn)練組分別與C組比較，均無顯著性差異；P-α訓(xùn)練與P-α比較，P-μ，訓(xùn)練組與P-μ組比較，也均無顯著性差異。
　　 (2)抗氧化能力：在SS線粒體中，P-α組與C組比較GSH濃度極顯著性上調(diào)；在IMF線粒體中，P-α訓(xùn)練組GSH與C組比較顯著性上調(diào)；P-α組與C組比較 T-SOD活性有顯著性上調(diào)，P-α訓(xùn)練組與 P-α組比較 T-SOD活性有顯著性上調(diào)。
　　 (3)P-α訓(xùn)練組和P-μ訓(xùn)練組與C組

6、比較p53 mRNA顯著上調(diào)；P-μ組，P-α訓(xùn)練組和P-μ訓(xùn)練組與C組比較Beclin-1 mRNA極顯著上調(diào)，P-α訓(xùn)練組與P-α組比較，P-μ組與P-μ訓(xùn)練組比較Beclin-1 mRNA極顯著性上調(diào)；P-μ組，P-α訓(xùn)練組和P-μ訓(xùn)練組與C組比較Bax mRNA極顯著上調(diào)，P-μ組與P-μ訓(xùn)練組比較Beclin-1 mRNA極顯著性上調(diào)。
　　 (4)P-μ訓(xùn)練組與C組比較LC3 mRNA和Atg7mRNA極顯著性上調(diào)；

7、耐力運(yùn)動P-μ組與P-μ訓(xùn)練組LC3 mRNA和Atg7mRNA極顯著性上調(diào)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)耐力訓(xùn)練和p53抑制劑對老齡ICR小鼠體重沒有影響(2)在線粒體亞組分中，增齡和注射p53抑制劑導(dǎo)致的氧化應(yīng)激損傷和是否可以通過耐力運(yùn)動得到緩解的效果不同。
　　 (3)耐力訓(xùn)練可上調(diào)自體吞噬相關(guān)基因LC3，Atg7，Beclin-1mRNA，表明白體吞噬有增強(qiáng)的趨勢，可能是由于運(yùn)動過程分解代謝加強(qiáng)，需要清除