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文檔簡介
1、本文研究了粒毛盤菌YM240胞外多糖的分離純化、結(jié)構表征、羧甲基化修飾、硫酸化修飾,以及修飾前后的體外抗氧化和降血糖及對體內(nèi)降血糖和降血脂活性。
粒毛盤菌YM240發(fā)酵液經(jīng)水提醇沉、脫色和脫蛋白后獲得胞外多糖,再經(jīng)DEAE-cellulose52和SephadexG-100色譜柱分離純化,得單一組分LEP; HPLC、GC-MS、甲基化分析、FT-IR和1D/2D NMR等實驗結(jié)果表明LEP的分子量為1.68×103 kDa,
2、由摩爾比為16.3∶1.0的甘露糖(Man)和半乳糖(Gal)構成;(1→3)-α-D-Manp、(1→3,4)-α-D-Manp和(1→3)-α-D-Galp構成LEP的主鏈;α-D-Manp-(1→2)-α-D-Manp-(1→3)-α-D-Manp-(1-構成支鏈,連接在主鏈上Manp的C-4位。對LEP進行化學修飾,獲得取代度為0.360的羧甲基化多糖CLEP和取代度為0.144的硫酸化多糖SLEP。紅外光譜和核磁共振碳譜分析結(jié)
3、果表明,多糖的的羧甲基化和硫酸化修飾成功,羧基甲基-CH2COOH取代在(1→2)-α-D-Manp的C-3、(1→3)-α-D-Manp的C-4和(1→)-α-D-Manp的C-6上,而硫酸基-SO3H主要取代在(1→2)-α-D-Manp的C-4和(1→3)-β-D-Galp的C-6上。
體外抗氧化實驗表明,與LEP相比,CLEP和SLEP對DPPH自由基和羥基自由基的清除作用及還原力都顯著增強。體外降血糖活性實驗結(jié)果顯示
4、,CLEP和SLEP對α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑的制活性及葡萄糖擴散的抑制作用明顯高于LEP。
采用不同含量的LEP、CLEP和SLEP處理鏈脲佐菌素(STZ)及高脂飼料誘導的Ⅱ型糖尿病小鼠(T2DM)。與LEP相比,CLEP和SLEP顯著增加體重、臟器指數(shù)、肝糖原、葡萄糖耐量,明顯降低空腹血糖水平(FBG)、空腹血清胰島素(FINS)和糖化血紅蛋白(HbA1c)以及血清甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)和游離脂肪酸(FFA)
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