漢防己甲素衍生物的合成及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的：
　　經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，天然化合物漢防己甲素有著優(yōu)良的抗腫瘤效果。課題組前期對(duì)其進(jìn)行了5位的化學(xué)結(jié)構(gòu)改造，并對(duì)其進(jìn)行了抗腫瘤活性篩選，發(fā)現(xiàn)5位改造后的抗腫瘤效果有所改善。在此基礎(chǔ)上，本文繼續(xù)以漢防己甲素為先導(dǎo)化合物，通過(guò)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，期望尋找到更加有效的新型抗腫瘤化合物，并對(duì)篩選出來(lái)的活性較好的化合物做初步的抗腫瘤機(jī)制研究。
　　方法：
　　以漢防己甲素為先導(dǎo)化合物，低溫環(huán)境下進(jìn)行5位溴取代，生成中間體5-溴漢防己

2、甲素，再通過(guò)Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)與一系列硼酸衍生物反應(yīng)，得到相應(yīng)的目標(biāo)化合物。并將化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)MS（質(zhì)譜）、1H NMR（核磁共振氫譜）、13C NMR（核磁共振碳譜）、熔點(diǎn)測(cè)定等技術(shù)手段進(jìn)行確證。
　　采用CCK-8法對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行了初步的體外抗腫瘤活性篩選。以先導(dǎo)化合物漢防己甲素為陽(yáng)性對(duì)照藥物，通過(guò)考察目標(biāo)化合物對(duì)P388（小鼠白血病細(xì)胞）、A549（人肺癌細(xì)胞）的抑制率來(lái)確定其抗腫瘤效果。
　　對(duì)目標(biāo)化合物的抗腫

3、瘤機(jī)制進(jìn)行初步探索，從13個(gè)目標(biāo)化合物中篩選出活性較好的目標(biāo)化合物h5，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定目標(biāo)化合物對(duì)A549細(xì)胞的凋亡及凋亡周期的影響。
　　結(jié)果：
　　本文共合成13個(gè)未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的新的漢防己甲素衍生物。經(jīng)MS、1H NMR、13C NMR、熔點(diǎn)測(cè)定等技術(shù)手段對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明均為目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)。
　　CCK-8法的體外抗腫瘤活性測(cè)定結(jié)果表明：大部分目標(biāo)化合物的IC50值小于10μM，其中以P388

4、細(xì)胞株篩選的13個(gè)新化合物的活性，目標(biāo)化合物h5、h11、h13的活性均優(yōu)于先導(dǎo)化合物漢防己甲素；以A549細(xì)胞株篩選的13個(gè)新化合物的活性，13個(gè)目標(biāo)化合物的活性均優(yōu)于漢防己甲素。
　　流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果分析表明：目標(biāo)化合物h5可促進(jìn)A549細(xì)胞的凋亡，且成一定的濃度依賴(lài)性；目標(biāo)化合物h5對(duì)A549細(xì)胞有一定的細(xì)胞周期阻滯作用，作用的周期為S期和G2期。
　　結(jié)論：
　　經(jīng)鑒定，13個(gè)新的漢防己甲素衍生物均為目標(biāo)化合物，

5、且均未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。
　　CCK-8法對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行的體外P388和A549細(xì)胞增值抑制活性篩選，結(jié)果表明目標(biāo)化合物h5、h11、h13對(duì)兩種腫瘤細(xì)胞均有較高的生物活性。其初步的構(gòu)效關(guān)系表明：在先導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)中引入含N、O、S的雜環(huán)基團(tuán)，有助于先導(dǎo)化合物的抗腫瘤活性改善；在先導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)中引入的苯并呋喃基團(tuán)的生物活性?xún)?yōu)于苯并噻吩，指示可能在引入的基團(tuán)中相對(duì)于噻吩，呋喃有更好的改善作用；當(dāng)引入的基團(tuán)為六元雜環(huán)苯并體系時(shí)，與先導(dǎo)化