載藥同軸納米纖維燒傷敷料的研究.pdf

1、燒傷在生產(chǎn)生活中經(jīng)常發(fā)生，其中深 II度燒傷很常見(jiàn)，其特點(diǎn)是創(chuàng)面腫脹蒼白，常伴有水皰。與I度和淺II度燒傷不同，深I(lǐng)I度燒傷須經(jīng)醫(yī)學(xué)處理才能愈合良好，其中燒傷敷料是最常用的治療方法。敷料可提供創(chuàng)面適宜微環(huán)境，對(duì)創(chuàng)面愈合及后期修復(fù)起到關(guān)鍵作用，但目前還未有理想的燒傷敷料滿(mǎn)足深 II度燒傷創(chuàng)面愈合的多種需求，包括保護(hù)創(chuàng)面、吸收滲出、促進(jìn)創(chuàng)面愈合、抗感染等。
　　靜電紡絲（Electrospinning）技術(shù)利用聚合物溶液或熔體在電場(chǎng)力

2、下帶電，并被拉伸產(chǎn)生形變，最終溶劑揮發(fā)固化形成纖維。靜電紡絲納米纖維的特點(diǎn)是尺度均一、長(zhǎng)徑較長(zhǎng)。納米纖維膜具有高孔隙率和高表面積體積比，與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)相似，適合作為創(chuàng)傷敷料。同軸納米纖維具有殼核狀或中空狀結(jié)構(gòu)，賦予納米纖維特殊的性能。同軸納米纖維的制備利用改進(jìn)的靜電紡絲工藝。該工藝采用不同的殼層溶液和芯層溶液，通過(guò)一個(gè)特殊的套管針頭同時(shí)靜電紡絲得到同軸納米纖維。
　　本文利用同軸靜電紡絲技術(shù)，將具有強(qiáng)大吸水能力的海藻酸鈉、廣譜抗

3、菌性能的殼聚糖、成纖維性良好的聚乙烯醇（PVA）及促傷口愈合的活性藥物-積雪草總苷結(jié)合，制備得到芯層載積雪草總苷的海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜，并研究其對(duì)深I(lǐng)I燒傷創(chuàng)面修復(fù)的促進(jìn)作用。
　　1.靜電紡絲法制備同軸納米纖維膜的處方工藝
　　海藻酸鈉與 PVA混合作為同軸納米纖維的殼層材料，芯層添加殼聚糖，篩選了同軸靜電紡絲工藝中的電壓、接收距離、殼層及芯層溶液濃度、推注速度等條件，最終確定同軸靜電紡絲法制備納米纖維的

4、最佳處方及工藝參數(shù)：殼層為0.8％(w/v)海藻酸鈉/7%(w/v)PVA混合溶液，芯層為3%(w/v)殼聚糖溶液；靜電紡絲工藝參數(shù)：電壓為23 kV，針頭至接收屏的接收距離為15cm，殼層及芯層推注速度分別為0.8、0.2ml/h。掃描電子顯微鏡（Scanning electron microscope，SEM）觀察海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜表面光滑，串珠結(jié)構(gòu)較少，平均直徑為373.74±90.74nm，分布均勻。

5、　　2.同軸納米纖維膜的結(jié)構(gòu)及性能
　　透射電子顯微鏡（Transmission electron microscope，TEM）觀察同軸納米纖維膜具有明顯的核-殼結(jié)構(gòu)，其中芯層直徑為99.2nm，殼層厚度為33.8nm。X射線衍射（X-ray diffraction，XRD）和傅里葉紅外光譜（Fourier transform infrared spectrum，F(xiàn)TIR）方法表征其結(jié)構(gòu)，證明了同軸納米纖維膜中各成分之間發(fā)生了一

6、定的相互作用，形成了與物理混合物不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)?？疾炝送S納米纖維膜的吸水性能，證明加入海藻酸鈉后能明顯提高納米纖維膜的吸水性能。加入殼聚糖增強(qiáng)了同軸納米纖維膜抗菌性能。
　　3.載藥同軸納米纖維膜的制備及釋藥
　　在同軸納米纖維膜處方工藝的基礎(chǔ)上，制備芯層含積雪草總苷（積雪草總苷含量分別為1.5、2.5、5%，w/w）的載藥同軸納米纖維膜。掃描電鏡觀察載藥同軸納米纖維膜，纖維平均直徑為433.37±75.47nm，分布均勻

7、，串珠結(jié)構(gòu)少。
　　高效液相色譜法測(cè)定積雪草總苷中單體成分積雪草苷含量，進(jìn)一步計(jì)算載藥同軸納米纖維膜中積雪草總苷的含量。確定積雪草苷液相色譜條件為：高效液相色譜儀：安捷倫1260型；色譜柱Diamonsil? C18（5μm，250×4.6mm）；柱溫：30℃；流動(dòng)相：乙腈：水=29：71(v/v)；檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：20μl。建立積雪草苷標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程A=4.6748C+4.585（r=

8、0.9999），在10-400μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；5天內(nèi)精密度良好，RSD<2%。表明該方法精確可靠，可用于積雪草總苷定量分析。
　　載藥同軸納米纖維膜的體外藥物釋放結(jié)果表明其具有明顯的藥物緩釋效果，同普通非同軸混紡納米纖維膜相比，同軸納米纖維膜釋放緩慢，無(wú)藥物突釋現(xiàn)象，釋藥10h后，累積釋放達(dá)到80%。經(jīng)方程擬合，其釋藥機(jī)制符合Ritger-Peppas方程，證明藥物釋放以Fick’s擴(kuò)散為主。
　　4.載藥同軸

9、納米纖維膜治療深I(lǐng)I度燒傷的藥效學(xué)研究
　　采用臺(tái)式超級(jí)控溫?zé)齻麅x建立SD大鼠深I(lǐng)I度燒傷模型，燒傷儀具體參數(shù)為：燙頭溫度80℃，壓力500g，燙頭與皮膚接觸時(shí)間8s。
　　創(chuàng)面組織學(xué)檢查、創(chuàng)面愈合率及病理學(xué)結(jié)果表明，空白及載藥同軸納米纖維膜對(duì)大鼠深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面愈合均具有明顯促進(jìn)作用，傷后第18天創(chuàng)面已基本愈合，較模型組具有顯著性差異，但未表現(xiàn)出明顯的劑量依賴(lài)性。
　　采用免疫組化、ELISA初步探討同軸納米纖維膜促

10、進(jìn)大鼠深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面的愈合機(jī)制，發(fā)現(xiàn)同軸納米纖維膜可上調(diào)創(chuàng)面組織的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子（Cluster of differentiation31，CD31）、增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen，PCNA）等細(xì)胞因子的表達(dá)，進(jìn)而加速創(chuàng)面愈合。同時(shí)，同軸納米纖維膜還可下調(diào)創(chuàng)面腫瘤壞死因子