蛋白質結合小分子（離子）物質及變構效應.pdf

1、小分子(離子)與生物大分子相互作用的研究是探索各類小分子(離子)生物學效應和功能的基本途徑之一，此類課題的研究有助于人們從分子層面了解生命過程。 采用熒光光譜(FS)、紫外光譜(UV)研究了中藥有效成分鹽酸小檗堿(BC)在胃蛋白酶(pepsin)分子上的結合過程，應用核磁共振(1HNMR)技術研究了BC、苯甲酸鈉、葡萄糖、維生素C(VC)與牛血清白蛋白(BSA)和胃蛋白酶(pepsin)相互作用的關鍵結合部位以及咪唑型離子液體與

2、BSA相互作用的關鍵結合部位。為探討離子液體的潛在毒性，采用多種光譜手段研究了咪唑型離子液體與BSA的相互作用?？紤]到生物體內小分子(離子)在結合蛋白質時相互作用的復雜性，采用光譜手段研究了共存物對中藥有效成分七葉內酯—BSA、BC—pepsin相互作用的擾動以及金屬離子(Cu2+、Zn2+)、BC與BSA結合過程中的變構效應，并結合圓二色(CD)光譜對其機理進行了探討。為更準確的獲取藥物分子—蛋白質相互作用參數，基于同步熒光獲得了BC

3、與pepsin分子中色氨酸、酪氨酸相互作用的定量參數；借助SAS軟件嘗試建立藥物小分子—血清白蛋白結合過程構效關系的一般數學規(guī)律。在本文實驗范圍內，主要結論如下： 1.BC對Cu2+猝滅BSA內源熒光呈負變構效應，而對BSA—Cu2+復合物穩(wěn)定性以及Cu2+在BSA分子上的結合位點呈正變構效應。Cu2+、Zn2+對BC猝滅BSA內源熒光呈正變構效應，而對BSA—BC復合物穩(wěn)定性以及BC在BSA分子上的結合位點呈負變構效應。

4、 2.BC能夠以特定取向方式插入pepsin分子的疏水空腔，且距酪氨酸殘基的平均結合距離最近。BC與BSA和pepsin分子的關鍵結合部位為BC分子中的共軛π體系異喹啉環(huán)和苯環(huán)結構；苯甲酸鈉(SB)、葡萄糖、VC與BSA、pepsin結合的關鍵部位各有不同，三者在蛋白質分子上的結合部位可能處于臨近蛋白質分子表面的親水區(qū)域層。 3.實驗所選的共存物對七葉內酯—BSA、BC—pepsin結合過程存在不同程度的擾動，與BSA結合引致

5、BSA分子構象的改變是共存物參與并影響七葉內酯—BSA相互作用過程的共同機制，但各種共存物擾動的具體方式有所不同，如離子架橋(I—)，同位取代(SB)，對藥物結合部位的破壞(SDS)，使BSA構象的轉變(TW—80、VC、葡萄糖)。 4.咪唑型離子液體與BSA結合的關鍵部位為其陽離子部分，但陽離子部分不是使BSA內源性熒光產生猝滅的主要基團，且咪唑型離子液體在BSA上的結合部位不深，與BSA的相互作用比較復雜，作用結果使BSA的