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文檔簡介
1、分子刺激朊蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化很多證據(jù)支持這一假設(shè)的傳染病的代理人朊病毒病是缺乏核酸,而是由一個特定的傳染性蛋白。這種蛋白,朊病毒,似乎是由模板誘導(dǎo)構(gòu)象變化的正常表達蛋白,朊(參考文獻2)。雖然有無數(shù)的研究已經(jīng)建立的轉(zhuǎn)換X朊病毒作為中央致病事件的朊病毒疾病,它是未知是否之外的其他因素可能是基因的細胞為了促進有效的朊病毒蛋白生產(chǎn)。我們調(diào)查生物化學(xué)放大抗蛋白酶的prpsclike蛋白(具有)使用一種修改臺的可循環(huán)擴增method4。在這里,我們報告
2、,計量轉(zhuǎn)換X具有體外需要具體核糖核酸分子。值得注意的是,而哺乳動物核糖核酸制劑具有刺激體外擴增,核酸準(zhǔn)備從無脊椎動物物種不。我們的研究結(jié)果表明,編碼的刺激分子可能有作用的朊病毒疾病的發(fā)病機制。他們還提供一個實用的方法提高診斷的靈敏度技術(shù)的基礎(chǔ)上具有放大。我們以前表明,具有體外擴增股份許多具體特點與致病過程中的朊病毒傳播在體內(nèi),包括應(yīng)變和物種specificity3。在一個典型的擴增反應(yīng),稀釋的朊病毒感染的腦組織勻漿(0.1%瓦特五)和5
3、%(瓦特五)正常腦組織勻漿或緩沖控制和培養(yǎng)一夜之間在37轉(zhuǎn)到。倉鼠sc237具有放大約6倍,在這些條件下(圖1,comparemwith律師)。而生化特征要求具有放大的反應(yīng),我們驚訝發(fā)現(xiàn)治療的反應(yīng)dnasefree,異構(gòu)胰腺核糖核酸酶廢除具有放大劑量依賴的方式(圖1,第一面板)。在體外具有放大還廢除治療與純化核糖核酸酶,核糖核酸酶,微球菌核酸,或benzonase(圖1)。在控制實驗中,余的乙酯透析。我們的研究結(jié)果表明沒有這三個核酸擴增
4、的抑制具有無效的國家,支持這一假設(shè)的完整核糖核酸分子推動這一進程(圖2)。要測試是否抑制具有擴增可能是介導(dǎo)的最終產(chǎn)品的核糖核酸酶消化,我們直接測量影響循環(huán)20,30guanidine磷酸(鳥苷)和30—磷酸胞苷(中醫(yī))上具有放大。既不這些核苷酸抑制在體外具有放大濃度為1毫米(圖2)。我們的控制實驗排除可能性污染蛋白酶,位阻,或消化產(chǎn)物帳戶的抑制具有擴增的特異性核酸酶。兩者合計,這些實驗表明,核糖核酸是需要具有放大在體外。我們試圖確定是否
5、分離制備核糖核酸分子可以重建能力nucleasetreated正常腦組織勻漿放大具有。值得注意的是,總核糖核酸分離倉鼠大腦成功重組的benzonasepretreated腦勻漿放大能力具有以劑量依賴的方式(圖3)。相比之下,純化硫酸乙酰肝素蛋白多糖(多糖)未能重建具有擴增(圖3)。其他陰離子,如單鏈DNA(圖3),多聚腺苷酸,硫酸乙酰肝素,戊聚糖聚谷氨酸和硫酸酸(數(shù)據(jù)未顯示)也未能刺激具有放大。在這個和其他重建實驗,benzonase—
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