N-糖鏈新受體的開發(fā)及其應用.pdf

1、近年，因N-連接糖鏈對細胞癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移、以及造血功能有密切關系，因而，其結構與生物功能之間關系研究倍受人們的關注。為了這些研究能夠順利進行，不僅需要研制開發(fā)相關糖類分析儀器，而且更急需開發(fā)糖鏈相關試劑和新的簡便、高靈敏、高選擇性的N-連接糖鏈分析方法。
　　從冷凍的毛霉菌中提取出來的內(nèi)-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶M（Endo-M酶）具有切斷N-連接糖鏈五糖核心最內(nèi)側(cè)的兩個N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc-GlcNAc）之間的糖苷

2、鍵，將其中一個GlcNAc留在多肽鏈上，并把釋放出來的糖鏈轉(zhuǎn)移到另外一個含有GlcNAc殘基的受體上的特性。根據(jù)Endo-M的這些特性，設計合成了既含有GlcNAc又含有電活性基團的受體，優(yōu)化了各受體的合成以及純化方法，初步探討了在糖鏈轉(zhuǎn)移酶Endo-M作用下各種受體與N-連接糖鏈的轉(zhuǎn)移結合過程，由于所合成的受體易離子化或已帶電荷，所以可以提高糖鏈衍生物在質(zhì)譜檢測器上的靈敏度。我們還進行了實際樣品卵清蛋白的檢測，用糖鏈酶解霉 E酶切卵清