毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法分析擬南芥中的茉莉酸.pdf

1、茉莉酸是一種由亞麻酸衍生的,具有環(huán)戊酮結(jié)構(gòu)的植物激素,廣泛存在于各種植物中。人們對(duì)茉莉酸的生物合成和分子代謝做了詳細(xì)的研究,發(fā)現(xiàn)茉莉酸參與許多基因的表達(dá)調(diào)控。茉莉酸在植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)中的作用分為兩個(gè)方面:一部分與植物發(fā)育有關(guān),如:種子和花粉萌發(fā)、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖、衰老組織脫落和塊莖形成;另一部分與植物的脅迫耐受有關(guān),如:機(jī)械損傷、病原菌感染、昆蟲(chóng)啃食、微生物侵害和干旱。
　　雖然茉莉酸在植物生長(zhǎng)發(fā)育中具有非常重要的調(diào)節(jié)作用,但是其在

2、植物組織中的含量卻比其它的植物激素低許多,不利于分離檢測(cè),不利于對(duì)茉莉酸的深入研究。為了研究茉莉酸的生理學(xué)功能,我們需要一種高靈敏度高選擇性的檢測(cè)方法對(duì)植物中的茉莉酸進(jìn)行分析。
　　目前為止,已經(jīng)報(bào)道了多種檢測(cè)茉莉酸的方法。比較常用的方法有:質(zhì)譜分析法(MS)、氣-液相色譜法-質(zhì)譜分析法(GC–MS)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、高效液相色譜法(HPLC)、放射免疫檢測(cè)法(RIA),這些檢測(cè)方法的檢測(cè)限比較高,但是都有一些難以克

3、服的不足之處。MS和GC-MS需要在高溫條件下對(duì)檢測(cè)茉莉酸進(jìn)行分析,使樣品發(fā)生分解,部分茉莉酸被破壞影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,也就不能滿足對(duì)茉莉酸進(jìn)行痕量分析的要求?；谔囟贵w的RIA和ELISA對(duì)茉莉酸進(jìn)行檢測(cè)時(shí),與結(jié)構(gòu)相似化合物的交叉反應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果具有很大的影響。高效液相色譜法(HPLC)和熒光檢測(cè)(LIF)聯(lián)用也能對(duì)茉莉酸進(jìn)行檢測(cè),但是這種方法需要通過(guò)復(fù)雜的分離提純操作將茉莉酸與植物樣品中的大量其它熒光化合物分離開(kāi)來(lái)。
　　毛

4、細(xì)管電泳(CE)是一種發(fā)展迅速的分離檢測(cè)方法,它能夠與多種的檢測(cè)方法連接使用,如:毛細(xì)管電泳紫外可見(jiàn)檢測(cè)(CE-UV)和高效毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)(CE-LIF),具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏的優(yōu)點(diǎn)。毛細(xì)管電泳由于對(duì)植物大分子分析的小劑量、高靈敏、高效率以及低耗時(shí)的特點(diǎn),在生物科學(xué)研究中獲得了廣泛的應(yīng)用。毛細(xì)管電泳紫外可見(jiàn)檢測(cè)法對(duì)茉莉酸進(jìn)行分析的靈敏度不如高效毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法的理想。毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)(LIF)具有最高的