毛細管電泳免疫分析法檢測諾氟沙星獸藥殘留.pdf

1、農(nóng)獸藥殘留是影響食品安全的主要因素之一，建立快速有效的檢測分析方法對食品品質(zhì)監(jiān)管具有十分重要的意義。諾氟沙星是一類人畜共用的合成抗生素，屬于第三代氟喹諾酮類藥物，臨床上廣泛用于治療消化系統(tǒng)紊亂和泌尿生殖感染等癥狀。如果長期食用若氟沙星殘留過量的食品，通過食物鏈的蓄積作用，不僅會紊亂人體內(nèi)分泌系統(tǒng)，甚至還會造成體內(nèi)細菌耐藥性增強，影響藥物的治療效果。毛細管電泳免疫分析技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種新型分析技術(shù)，它將電泳法的高分離效率和免疫法的高

2、靈敏度結(jié)合起來。由于具有高通量、樣品處理簡單、耗樣量少等突出優(yōu)點，此法廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工等分析應(yīng)用領(lǐng)域。
　　本研究將毛細管電泳免疫法應(yīng)用于諾氟沙星檢測，建立了諾氟沙星毛細管電泳免疫分析聯(lián)用激光誘導(dǎo)熒光檢測器的檢測方法。本方法基于熒光標記諾氟沙星和諾氟沙星標準品競爭結(jié)合少量氟喹諾酮類多克隆抗體，通過檢測器檢測，產(chǎn)生游離的諾氟沙星和抗原抗體免疫復(fù)合物兩個峰，峰面積會隨著諾氟沙星標準品的濃度變化而相應(yīng)改變，因而能對諾氟沙星定性

3、定量分析。實驗中合成出熒光標記物，同時優(yōu)化了影響毛細管電泳分離效果的各項因素，如免疫反應(yīng)孵育時間、電泳緩沖液的濃度與pH值、電泳分離電壓與進樣量等。
　　結(jié)果表明，在25 kV電壓下，抗原抗體孵育5 min后0.5 psi壓力下進樣5s，電泳緩沖液組成為pH8.030 mM Na2B4O7-10 mM NaH2PO4，5 min內(nèi)即可完成分離，各峰峰形好，分離度較高。新建立的分析方法在0.08～50 ng/mL范圍內(nèi)線性良好，最低