鏈格孢菌侵染對(duì)西蘭花品質(zhì)的影響及致病機(jī)理研究.pdf

1、西蘭花營養(yǎng)豐富，富含維生素C、纖維等營養(yǎng)成分，是廣大消費(fèi)者喜愛的蔬菜之一。因?yàn)槠漤敹擞芯o湊形成的花蕾，組織結(jié)構(gòu)幼嫩，容易受到機(jī)械損傷和病原真菌污染，破壞西蘭花的表面，導(dǎo)致大量的經(jīng)濟(jì)損失。西蘭花較嚴(yán)重的病害為鏈格孢引起的黑斑病，病癥為初期花球表面出現(xiàn)黑點(diǎn)，隨后迅速黃化、腐敗，導(dǎo)致西蘭花加速衰老。
　　本文以西蘭花為對(duì)象，對(duì)其中的病原鏈格孢進(jìn)行分離鑒定，討論貯藏溫度對(duì)Alternaria alternata菌絲和孢子生長的影響，探究A

2、.alternata侵染對(duì)西蘭花自身品質(zhì)的影響，通過優(yōu)化后的培養(yǎng)條件富集產(chǎn)細(xì)胞壁降解酶，分析粗酶液對(duì)西蘭花的致病作用，探究A.alternata的致病機(jī)理，并在體外研究了肉桂醛、肉桂酸對(duì)西蘭花A.alternata生長的抑制作用，以期為西蘭花病害研究提供理論參考、病害防治提供新的思路。
　　1.西蘭花鏈格孢菌的分離純化和鑒定:
　　(1)西蘭花花球感染病原的侵害明顯高于花梗，可能是因?yàn)榛ɡ俳M織許多幼嫩的組織和其暴露在空氣中。

3、鑒定的黑斑病的病原菌有2種鏈格孢，分別為A.alternata和A.tenuissima， A.alternata的致病力較強(qiáng)。
　　2.溫度對(duì)A.alternata生長和致病力的影響:
　　(1)在4℃、18℃和25℃貯藏溫度下溫度下探究A.alternata的生長能力和致病性，A.alternata在下4℃、18℃和25℃均能生長，且存在致病力，貨架期溫度18℃生長的速率較快;4℃低溫對(duì)不能完全抑制A.alternata

4、的菌絲生長和孢子萌發(fā)。
　　(2)55℃水浴、85℃水浴處理10 min的方法能有效地抑制A.alternata的菌絲生長和孢子萌發(fā)。
　　3.A.alternata侵染對(duì)西蘭花品質(zhì)影響:
　　(1)A.alternata侵染西蘭花后，無論是花球還是花梗在可溶性蛋白、可溶性糖、維生素C、葉綠素、可滴定酸和MDA均有變化，且花球比花梗的品質(zhì)變化更嚴(yán)重，說明花球更易遭受鏈格孢菌的侵染。
　　(2)A.alternat

5、a侵染西蘭花后，花球處理組的可溶性蛋白變化差異較大，且迅速黃化，推測(cè)A.alternata侵染過程中西蘭花花球的加速衰老可能與可溶性蛋白增加、葉綠素降解有關(guān)。
　　4.A.alternata產(chǎn)3種細(xì)胞壁降解酶培養(yǎng)條件的正交優(yōu)化及其對(duì)西蘭花的致病作用:
　　(1)A.alternata產(chǎn)Cx最佳工藝:培養(yǎng)溫度是30℃，培養(yǎng)基初始pH是7，培養(yǎng)碳源是0.5％的CMC，培養(yǎng)時(shí)間是6d，培養(yǎng)氮源是1％的KNO3，Cx活是110.53

6、±1.02 U/mL。
　　(2)A.alternata產(chǎn)PMG最佳工藝:培養(yǎng)溫度是30℃，培養(yǎng)基初始pH是5，培養(yǎng)碳源是1％的果膠，培養(yǎng)時(shí)間是6d，培養(yǎng)氮源是1％的KNO3，PMG活是128.75±0.96 U/mL。
　　(3)產(chǎn)β-GLU最佳工藝:培養(yǎng)溫度是30℃，培養(yǎng)基初始pH是6，培養(yǎng)碳源是1％的葡萄糖，培養(yǎng)時(shí)間是6d，培養(yǎng)氮源是1％的KNO3，β-GLU活是108.78±4.33 U/mL。
　　(4)在西

7、蘭花活體內(nèi)均能檢測(cè)到3種細(xì)胞壁降解酶活，在花球中的細(xì)胞壁降解酶酶活高于花梗中;PMG酶在A.alternata產(chǎn)生的3種細(xì)胞壁降解酶中酶活值是最高的。
　　(5)粗酶液直接處理西蘭花花球，3種粗酶液均對(duì)花球造成損傷，發(fā)現(xiàn)PMG處理花球損傷最為嚴(yán)重;通過浸解作用觀察，PMG處理在還原糖和電導(dǎo)率變化較大，Cx高于β-GLU。鏈格孢對(duì)西蘭花的致病機(jī)理是Cx、PMG和β-GLU3種細(xì)胞壁降解酶的綜合作用，其中PMG起主要作用。
　　

8、5.3種物質(zhì)在體外對(duì)西蘭花A.alternata的抑制作用:
　　(1)在濃度為500μg/mL時(shí)，咪鮮胺、肉桂酸和肉桂醛都表現(xiàn)為對(duì)西蘭花A.alternata100％的抑制率，而綠原酸抑菌率為52.73±3.45％，后期試驗(yàn)對(duì)象選取為咪鮮胺、肉桂醛和肉桂酸。
　　(2)咪鮮胺、肉桂酸和肉桂酸在50-250μg/mL均對(duì)西蘭花A.alternata都具有抑制作用，對(duì)照組咪鮮胺表現(xiàn)為在濃度為200μg/mL時(shí)，抑菌率達(dá)到100