西蘭花中蘿卜硫苷的提取及降解產(chǎn)物抑菌活性研究.pdf

1、硫代葡萄糖苷(簡稱硫苷，Glucosinolates，縮稱GS)是十字花科植物具有的一種重要的含硫次生代謝產(chǎn)物，特別是存在于西蘭花、花椰菜、大白菜等。當存在芥子酶時，硫苷會發(fā)生酶解反應，無酶時處于變溫變壓的條件下也會發(fā)生非降解反應。大量的研究發(fā)現(xiàn)，食用更多的十字花科蔬菜能防止很多癌癥的發(fā)生。因此，探求和開發(fā)十字花科植物中的硫苷，使之在人們生產(chǎn)有價值的保健產(chǎn)品方面發(fā)揮重大影響作用。
　　西蘭花(broccoli)又被稱為青花菜、美國

2、花菜等，是十字花科蕓苔屬甘藍變種之一。西蘭花中的硫苷含量十分豐富，其中包含大量活性大的蘿卜硫苷（4-甲基亞磺?；∠┗蜍眨℅lucoraphanin））。很多研究者在十字花科蔬菜中發(fā)現(xiàn)，蘿卜硫苷主要的降解產(chǎn)物蘿卜硫素（Sulforaphane）為最有前景的一類抗癌活性物質(zhì)。
　　本論文選取西蘭花為研究材料，探究其最佳滅酶及烘干條件、硫苷的提純工藝參數(shù)條件以及西蘭花種子降解產(chǎn)物的初步抑菌活性等，從而為西蘭花及其硫苷特性的進一步研究

3、作參考，而且也為硫苷在相關的保健品工業(yè)化生產(chǎn)研發(fā)提供一定的理論依據(jù)，為硫苷在發(fā)酵食品防腐劑方面的應用提供相關的研究基礎。得到如下結論:
　　1、比較微波處理、熱處理、打漿處理、浸泡處理和超聲處理對滅酶效果的影響，得到最佳條件為75℃95％乙醇加熱到80℃，保持20 min。比較鼓風干燥、微波干燥和自然干燥對滅酶處理后原料干燥處理，對比其水分及硫苷含量和損失率，綜合考慮，微波干燥只需要240s，較少的硫苷損失，值得采納。
　　

4、2、通過單因素和響應面優(yōu)化實驗，得到西蘭花干中硫苷的最優(yōu)工藝條件為:提取溫度為80℃，提取料液比為1∶12，提取時間為30 min，提取次數(shù)為4次，得到的西蘭花粗提物中硫苷含量為21.79 mg/g，得率為20.21％。純化實驗設計了乙醇沉淀法和固相吸附洗脫法兩種。0℃下100％乙醇洗脫，沉淀中硫苷的回收率高達91.5％，經(jīng)冷凍干燥后得到固體粉末中的硫苷含量為33.78 mg/g，相對于前期提取的粗提物的含量提高72.02％;提取液中1

5、∶2加入去離子水離心的實驗，得到固體粉末的硫苷含量為23.75 mg/g，提高8.72％。另一方面，在吸附洗脫法中，挑選了10種填料進行靜態(tài)法比較，發(fā)現(xiàn)高嶺土、PVP/P、硅藻土和硅膠對其的吸附能力都非常低，吸附率分別為2.16％、1.93％、0.08％和1.99％，作為固相吸附劑，吸附西蘭花硫苷提取液中的干擾物，得到固體粉末的硫苷含量分別為28.81 mg/g、25.79 mg/g、30.73 mg/g、27.47 mg/g，分別提高

6、了32.11％、18.35％、40.83％和26.15％。顆粒活性炭、粉末活性炭和離子樹脂對硫苷提取液的吸附能力最強，吸附率分別達91.92％、99.99％和98.11％。固定離子樹脂為吸附劑的情況下，按照對硫苷的洗脫效果進行洗脫劑的選擇，發(fā)現(xiàn)0.5 mol/L氯化鈣溶液在10種洗脫劑中效果最佳為47.9％，得到的洗脫液再用殼聚糖和CO2分別除去氯離子和鈣離子。在上述幾種純化方法中硫苷含量均有所提高，初步為其生產(chǎn)相關的保健品提供一定的理

7、論方法基礎。
　　3、研究西蘭花種子中提取的硫苷降解產(chǎn)物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、米酒乳桿菌和短乳桿菌的抑菌效果。其中，提取液原液(3.645mg/g)、12MIC(2.734 mg/mL)對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌都達到了極敏水平，但是對大腸桿菌的抑菌效果更加明顯，8MIC(1.823mg/mL)濃度對大腸桿菌的抑菌效果也是在極敏水平，而對枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌則降到了高敏水平;還發(fā)現(xiàn)提取液對