rhodococcussp.r04水解酶bphd的定向進(jìn)化及其突變酶的性質(zhì)研究

1、山西大學(xué)2 0 1 3 屆碩士學(xué)位論文R h o d o c o c c u s s p ·R 0 4 水解酶B p h D 的定向進(jìn)化及其突變酶的性質(zhì)研究作者姓名 高沖指導(dǎo)教師 楊秀清副教授學(xué)科專業(yè) 微生物學(xué)研究方向 生物轉(zhuǎn)化與生物催化培養(yǎng)單位 生物技術(shù)研究所學(xué)習(xí)年限 2 0 1 0 年9 月至2 0 1 3 年6 月二。一三年六月目錄中文摘要?????????????????????????????IA B S T R A

2、 C T ???????????????????????????????????????．Ⅲ第一章文獻(xiàn)綜述????????????????????????????11R h o d o c o c c u s s p ．R 0 4 水解酶?????????????????????11 ．1 R h o d o c o c c u s s p ．R 0 4 水解酶??????????????????．．11 ．2R h o d o c o

3、 c c u s s p ．R 0 4 水解酶的催化三聯(lián)體????????????．．11 ．3R h o d o c o c c u s s p ．R 0 4 水解酶的研究進(jìn)展?????????????．．22 定向迸化技術(shù)???????????????????????????22 ．1 突變體基因文庫的構(gòu)建????????????????????．32 ．2 文庫的篩選?????????????????????????．52 ．3

4、定向進(jìn)化的應(yīng)用???????????????????????．63 蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的測定方法?????????????????????73 ．1 晶體蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的測定??????????????????．73 ．2 溶液中蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的測定?????????????????．74 本論文研究的目的和意義??????????????????????8參考文獻(xiàn)??????????????????????????????9第二章R h

5、o d o c o c c u s s p ．R 0 4 水解酶B p h D 的定向進(jìn)化???????????1 51 材料????????????????????????????????????????．1 51 ．1 菌株和質(zhì)粒?????????????????????????1 51 ．2 培養(yǎng)基???????????????????????????1 51 ．3 主要的酶和化學(xué)試劑?????????????????????1

6、51 ．4 主要儀器設(shè)備????????????????????????1 62 方法????????????????????????????????????????．1 62 ．1D N A s h u f f l i n g 源基因的獲得??????????????????1 62 ．2D N a s e I 消化????????????????????????．1 72 ．3 無引物P C R ??????????????????