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文檔簡介
1、本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷鵝(鵝(GooseGoose)雌二醇()雌二醇(E2E2)ELISAELISA檢測試劑盒檢測試劑盒使用說明書檢測原理檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被雌二醇(E2)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用
2、下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻
3、漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品自備物品1.酶標儀(450nm)2.高精度加樣器及槍頭:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒溫箱操作注意事項操作注意事項1.試劑盒保存在28℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現(xiàn)
4、象,水浴加熱使結晶完全溶解(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷結果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃
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