唾液淀粉酶最適ph值測(cè)定畢業(yè)論文

1、唾液淀粉酶最適唾液淀粉酶最適pHpH值測(cè)定值測(cè)定摘要：摘要：了解唾液淀粉酶的最適ph，把酶學(xué)知識(shí)應(yīng)用于臨床診斷與應(yīng)用治療。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵?、了解酶的最適pH的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法并掌握精測(cè)唾液淀粉酶最適pH值的方法，熟悉緩沖溶液的配置；2、722分光光度計(jì)的使用。方法：相同時(shí)間內(nèi)，在溫度、酶濃度相同、pH值不同的條件下，酶的活性不同，水解的淀粉量不同，剩余的淀粉與過量的碘液生成的顏色不同，通過測(cè)定碘液與淀粉的不同程度水解的產(chǎn)物反應(yīng)后的吸光度，得

2、出酶的最適pH。結(jié)果：最適pH約為6.6。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：淀粉酶、pH、吸光度前言：前言：酶無論在生活中還是在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都有很大的研究意義，研究酶可以很好地應(yīng)用酶，并可以更好地發(fā)揮出它的各種特性，在各種領(lǐng)域能得到廣泛的應(yīng)用。影響酶反應(yīng)活力的因素很多，影響胞外酶的因素主要包括PH值、溫度和金屬離子、抑制劑及其他小分子，以及酶濃度等因素。PH值對(duì)酶反應(yīng)活力的影響：1、酸或堿可以使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞，引起酶的活力喪失，這種喪失活力可能是可逆的或者

3、是不可逆的，對(duì)可逆的來說，改變PH值后可使活力恢復(fù)，既具有復(fù)性。2、酸或堿影響酶的活性部位催化基團(tuán)的離解狀態(tài)，使得底物不能分解成產(chǎn)物。3、酸或堿影響酶的活性部位結(jié)合基團(tuán)的離解狀態(tài)，使得底物不能和它結(jié)合。4、酸或堿影響底物的離解狀態(tài)，或使底物不能和酶結(jié)合。由于上述各種原因，各種酶的作用都有一個(gè)最適合的PH值范圍。正文：正文：一、實(shí)驗(yàn)試劑與儀器一、實(shí)驗(yàn)試劑與儀器1、試劑試劑：0.2molLNa2HPO4、0.2molLNaH2PO4、2.5

4、gL淀粉、唾液、碘液、蒸餾水2、儀器儀器：吸量管（1mL、5mL）、小燒杯、移液器、試管、試管架、722型分光光度計(jì)、恒溫箱、洗耳球、pH試紙等二、實(shí)驗(yàn)原理：二、實(shí)驗(yàn)原理：ph的改變對(duì)酶的催化影響很大，酶催化活性最高時(shí)，反應(yīng)體系的PH值稱為最適PH值。本實(shí)驗(yàn)用唾液淀粉酶為材料來觀察酶活性受ph影響的情況。淀粉被分解越多，剩余底物越少，A值最小，過酸或過堿會(huì)抑制酶的活性，使底物分解減少，A值增大。碘液與淀粉的不同程度水解的產(chǎn)物反應(yīng)呈不同顏

5、色，即：淀粉（藍(lán)色）、紫色糊精（紫色）、紅色糊精（紅色）、麥芽糖及葡萄糖（黃色）。[1]利用朗伯—比爾定律，用分光光度計(jì)測(cè)量出各溶液在660nm處地吸光度A，從而間接測(cè)出唾液淀粉酶的最適位:ml）試劑123空白7.0pH緩沖液0.90.90.90.92.5gL淀粉0.10.20.3唾液（稀釋10倍）0.10.10.10.1混勻，37℃水浴5min，然后向每管加2滴碘液H2O5.95.85.76.0混勻，觀察現(xiàn)象，并選擇適中一支（顏色最淺

6、），記錄其用量4.4.酶液稀釋倍數(shù)確定酶液稀釋倍數(shù)確定稀釋倍數(shù)酶液與稀釋倍數(shù)酶液與H2O的相關(guān)用量的相關(guān)用量稀釋倍數(shù)510152025酶液（ml）1.00.50.40.250.2H2O（ml）4.04.54.64.754.8酶液最適稀釋倍數(shù)按下表操作選取酶液最適稀釋倍數(shù)按下表操作選取稀釋倍數(shù)510152025空白7.0pH緩沖液0.90.90.90.90.90.92.5gL淀粉由第3步操作確定唾液0.10.10.10.10.10.1混勻