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1、肌肉收縮性質(zhì)The Nature of Muscle Contraction,醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?(一)學(xué)會(huì)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備;(二)通過觀察骨骼肌的收縮形式,掌握神經(jīng)沖動(dòng)的頻 率與強(qiáng)度和肌肉收縮之間的關(guān)系;(三)明確閾刺激、閾下刺激、閾上刺激的概念。,二、相關(guān)理論知識(shí),(一)基本概念1.閾值:如果刺激時(shí)間一定,引起組織興奮所必需的最小刺激強(qiáng)度,稱為閾值(threshold) 或閾強(qiáng)度(threshol
2、d intensity)。2.強(qiáng)度小于閾值的刺激,稱為閾下刺激(subliminal)。3.強(qiáng)度大于閾值的刺激,稱為閾上刺激(supraliminal stimulus )。,二、相關(guān)理論知識(shí),(二)刺激引起興奮的條件 任何刺激要引起組織興奮,必須在以下三個(gè)方面達(dá)到某一最小值: 刺激強(qiáng)度(stimulus intensity) 刺激的持續(xù)時(shí)間(stimulus duration) 強(qiáng)度對(duì)時(shí)間的變化率(
3、stimulus intensity on the rate of change)。,二、相關(guān)理論知識(shí),(三)骨骼肌的收縮形式1.單收縮和強(qiáng)直收縮(1)單收縮(single twitch) 整塊骨骼肌或單個(gè)肌細(xì)胞受到一次短促的刺激時(shí),先是產(chǎn)生一次動(dòng)作電位,緊接著出現(xiàn)一次肌肉收縮,稱為單收縮。 最大收縮(maximum twitch ):將刺激強(qiáng)度逐步增大,肌肉收縮反應(yīng)也相應(yīng)增大,當(dāng)肌肉收縮不再隨刺激強(qiáng)度增加而增
4、大時(shí)的收縮,稱最大收縮。,二、相關(guān)理論知識(shí),(2)強(qiáng)直收縮(composite contraction) 如果給肌肉以連續(xù)的脈沖刺激,當(dāng)刺激頻率增加到某一限度時(shí),后來的刺激在前一次收縮未結(jié)束前即到達(dá)肌肉,于是肌肉在自身尚處于一定程度的縮短或張力存在的基礎(chǔ)上進(jìn)行新的收縮,發(fā)生所謂的收縮融合,稱強(qiáng)直收縮。 ①不完全強(qiáng)直收縮(incomplete tetanus) ②完全強(qiáng)直收縮(completely to
5、nic tetanus),不完全強(qiáng)直收縮,接近于“完全強(qiáng)直收縮”,二、相關(guān)理論知識(shí),圖 不完全強(qiáng)直收縮與完全強(qiáng)直收縮,二、相關(guān)理論知識(shí),圖 不完全強(qiáng)直收縮與完全強(qiáng)直收縮,二、相關(guān)理論知識(shí),2.等長(zhǎng)收縮和等張收縮(1)等長(zhǎng)收縮(2)等張收縮,二、相關(guān)理論知識(shí),(四)坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本在組織細(xì)胞興奮性和骨骼肌收縮觀察中的作用,刺激坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的神經(jīng)游離端,在經(jīng)過一個(gè)極短的潛伏期后,可以看到肌肉出現(xiàn)一次快速的收縮和舒張。
6、,三、實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線,(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 蟾蜍(四)藥品和器材 蛙類手術(shù)器械1套,刺蛙針1根,鋅銅弓1只,玻璃分針一根,萬能支架,任氏液,醫(yī)用計(jì)算機(jī)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),張力換能器。(五)方法與步驟 ?。保巧窠?jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備 ?。玻∪馐湛s的性質(zhì),1.坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本的制備,(播放視頻)(1)破壞腦脊髓 找到枕骨大孔處將刺蛙針刺入1-2mm,分別搗損腦組織和脊髓。(2)剪除軀干上部及內(nèi)臟 (3)剝
7、皮(4)游離坐骨神經(jīng) 腓腸肌向上將標(biāo)本固定于蛙板上,由脊柱仔細(xì)將坐骨神經(jīng)分離至膝關(guān)節(jié)處。(5)制成坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本 剪斷膝關(guān)節(jié)周圍所有大腿肌肉,剪斷股骨(保留約1cm),在跟腱處結(jié)扎并剪斷腓腸肌腱,將膝關(guān)節(jié)以下小腿部分全部剪除,剩下即為坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本。(6)標(biāo)本檢驗(yàn) 用鋅銅弓輕輕刺激坐骨神經(jīng),腓腸肌收縮即表示標(biāo)本制備完好。,2.肌肉收縮的性質(zhì),,2.肌肉收縮的性質(zhì),(2)刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響 ①Pc_L
8、ab實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目選擇; ②刺激方式用單刺激,刺激電壓初始值設(shè)為0V,將刺激強(qiáng)度逐步增大,觀察肌肉收縮反應(yīng)出現(xiàn)和相應(yīng)增大,讀出閾刺激和最大刺激強(qiáng)度數(shù)值。(3)肌肉的單收縮和強(qiáng)直收縮 ①選用串刺激,串脈沖數(shù)選“1”,用最大刺激強(qiáng)度采樣,觀察波形的高度與寬度。 ②選用串刺激,其他參數(shù)與單收縮相同,即可進(jìn)行采樣,并及時(shí)觀察波形變化情況。逐漸增加脈沖數(shù),觀察肌肉收縮形式的變化。,注意事項(xiàng),1. 保持坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本活性(
9、加任氏液、不要用手和器械夾捏)2. 每次刺激后必須讓標(biāo)本有一定的休息間隔。,神經(jīng)干動(dòng)作電位記錄及神經(jīng)干傳導(dǎo)速度測(cè)定Recording of Action Potential and Measurement of Conduction Velocity of Neural Trunk(虛擬實(shí)驗(yàn)),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?(一)學(xué)會(huì)蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備;(二)了解神經(jīng)干動(dòng)作電位的記錄方法,觀察神經(jīng)干雙向及單向動(dòng)作電位;(三)學(xué)習(xí)神經(jīng)干
10、動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度測(cè)定的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。,二、相關(guān)理論知識(shí),(一)細(xì)胞的生物電現(xiàn)象 在神經(jīng)—肌肉標(biāo)本實(shí)驗(yàn)中可以知道,神經(jīng)在受刺激時(shí),雖然不表現(xiàn)肉眼可見的變化,但它在受刺激的部位產(chǎn)生了一個(gè)可傳導(dǎo)的電變化,以一定的速度傳向肌肉,從而引起肌肉的興奮和收縮。 此現(xiàn)象可以通過生物信號(hào)放大系統(tǒng)記錄。,二、相關(guān)理論知識(shí),(二)動(dòng)作電位(Action potential,AP)的特點(diǎn) 1、概念 可興奮組織細(xì)胞受刺激后,產(chǎn)生的
11、可傳播的電位變化過程,稱動(dòng)作電位。 2、特點(diǎn) ①“全或無”現(xiàn)象:膜通道激活特性決定。 ②可傳播:峰電位反極化特性決定。,二、相關(guān)理論知識(shí),(三)興奮在同一細(xì)胞上的傳導(dǎo)機(jī)制 可興奮細(xì)胞的特征之一,就是它在膜的任何一處產(chǎn)生的動(dòng)作電位,都可沿著細(xì)胞膜向周圍傳播,使整個(gè)細(xì)胞都經(jīng)歷一次類似于被刺激部位的離子通透性的改變,表現(xiàn)為動(dòng)作電位沿整個(gè)細(xì)胞膜的傳導(dǎo)(conduction)。,二、相關(guān)理論知識(shí),(四)神經(jīng)干動(dòng)作電位的記
12、錄 雙相、單相動(dòng)作電位記錄,如圖所示。,二、相關(guān)理論知識(shí),(五)神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度測(cè)定原理 V=S/t(t2-t1)虛擬實(shí)驗(yàn),三、實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線,(一)制備蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本 1.破壞腦脊髓 2.剪除軀干上部及內(nèi)臟 3.剝皮 4.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備 在腓腸肌兩側(cè)肌溝內(nèi)找脛神經(jīng)和腓神經(jīng),剪去其中一支,分離另一支直至足趾,結(jié)扎并在遠(yuǎn)端剪斷,制成坐骨神經(jīng)干標(biāo)本,放入任氏液中備用。(二)連接實(shí)驗(yàn)裝置 連接神
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