衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導(dǎo)相關(guān)性的理論和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：建立衛(wèi)氣虛大鼠模型，選擇益氣固表之玉屏風(fēng)散制劑以治療方式或預(yù)防方式作用于模型動(dòng)物，觀察動(dòng)物造模及干預(yù)后在神經(jīng)免疫、神經(jīng)營養(yǎng)及神經(jīng)遞質(zhì)方面的改變。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，闡釋衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導(dǎo)之間的聯(lián)系，明確衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導(dǎo)相關(guān)的具體環(huán)節(jié)，從神經(jīng)傳導(dǎo)角度初步探討衛(wèi)氣實(shí)現(xiàn)其生理功能的可能機(jī)制，為衛(wèi)氣的感傳作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為氣脈理論作初步探索，豐富和充實(shí)中醫(yī)的衛(wèi)氣學(xué)說和絡(luò)脈學(xué)說內(nèi)容。比較玉屏風(fēng)散的治療功效和預(yù)防功效，探討益氣固表之玉屏風(fēng)散對(duì)衛(wèi)氣虛證的

2、神經(jīng)傳導(dǎo)功能方面的影響，為玉屏風(fēng)散臨床運(yùn)用范圍的擴(kuò)展提供依據(jù)。 方法：理論研究以中醫(yī)學(xué)衛(wèi)氣理論及絡(luò)脈理論為基礎(chǔ)，闡釋衛(wèi)氣的內(nèi)涵，并對(duì)神經(jīng)傳導(dǎo)的認(rèn)識(shí)進(jìn)行了分析。從衛(wèi)氣的生成、運(yùn)行、功能三個(gè)方面與神經(jīng)傳導(dǎo)相比較，論證了衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導(dǎo)的密切聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)研究：清潔級(jí)SD大鼠，200-250g，72只，隨機(jī)分為6組：正常組、衛(wèi)氣虛模型組、低免疫對(duì)照組、模型預(yù)防組、模型治療組及低免疫治療組。衛(wèi)氣虛模型組、模型預(yù)防組、模型治療組大鼠進(jìn)行寒、熱交

3、替刺激實(shí)驗(yàn)：先將各組大鼠分次放入特制鐵絲籠中，每籠6只，將籠子放入-20±1℃冰柜中20min，每隔10min觀察一次。取出動(dòng)物后，放常規(guī)飼養(yǎng)室飼養(yǎng)(室溫25±1℃)，4h后進(jìn)行溫?zé)岽碳?。即將各組大鼠分次放入40±1℃恒溫箱中15min，每隔5min觀察一次。取出后常規(guī)飼養(yǎng)。每天寒、熱交替刺激一次，連續(xù)6d。低免疫對(duì)照組、低免疫治療組采用低劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺10mg/kg·d連續(xù)6d，造成免疫功能低下大鼠模型。正常組和衛(wèi)氣虛模型組、低

4、免疫對(duì)照組：造模結(jié)束之日起灌服生理鹽水，連續(xù)7天。模型預(yù)防組：造模之日起以玉屏風(fēng)散沖劑灌胃1g/kg.d，連續(xù)7天。模型治療組、低免疫治療組：造模結(jié)束之日起以玉屏風(fēng)散沖劑灌胃1g/kg.d，連續(xù)7天。灌胃結(jié)束之日摘眼球取大鼠血清，采取內(nèi)固定法固定大鼠腦組織，取單側(cè)坐骨神經(jīng)及腹部皮膚。ELISA法測血清IL-2，血清及坐骨神經(jīng)NGF含量；免疫組化染色檢測皮膚及腦組織中P物質(zhì)含量，腦組織的細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：衛(wèi)氣虛模型組血清IL-2含

5、量較正常組升高，有非常顯著性差異(P＜0.01)，與低免疫對(duì)照組比較無顯著性差異(P＞0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型具有免疫功能的變化；模型治療組、模型預(yù)防組血清IL-2較衛(wèi)氣虛模型組降低，差異有非常顯著性(P＜0.01)，模型預(yù)防組較模型治療組血清IL-2降低，有非常顯著性差異(P＜0.01)，提示玉屏風(fēng)散對(duì)衛(wèi)氣虛有治療作用，同時(shí)玉屏風(fēng)散的預(yù)防作用有更好的療效。衛(wèi)氣虛模型組血清NGF高于正常組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型預(yù)防組血清NGF與衛(wèi)氣虛

6、模型組、低免疫對(duì)照組、低免疫治療組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，與正常組比較有顯著性差異(P＜0.05)；模型治療組血清NGF與正常組、低免疫治療組比較均有顯著性差異(P＜0.05)，與衛(wèi)氣虛模型組、低免疫對(duì)照組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)；模型預(yù)防組血清NGF水平低于模型治療組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明玉屏風(fēng)散的治療和預(yù)防能夠降低衛(wèi)氣虛模型的血清NGF水平。坐骨神經(jīng)中的NGF水平變化與血清中的NGF水平變化并不同步，衛(wèi)

7、氣虛模型組坐骨神經(jīng)中的NGF含量較其它組低，與正常組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，與模型預(yù)防組比較有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型的周圍神經(jīng)中NGF含量下降，玉屏風(fēng)散的預(yù)防作用可以防止此種變化。正常組、衛(wèi)氣虛模型組、模型治療組、模型預(yù)防組、低免疫對(duì)照組及低免疫治療組大鼠的腹部皮膚切片中皆可以見到棕黃色P物質(zhì)陽性染色區(qū)域。衛(wèi)氣虛模型組與低免疫對(duì)照組皮膚組織中P物質(zhì)陽性染色面積較正常組減少，有顯著性差異(P＜0.05)，

8、提示衛(wèi)氣虛損可引起皮膚P物質(zhì)含量減少，此種變化可能與機(jī)體免疫機(jī)能降低有關(guān)。衛(wèi)氣虛模型腦組織中額葉皮質(zhì)P物質(zhì)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)低于正常組，有非常顯著性差異(P＜0.01)，與模型預(yù)防組和模型治療組比較有顯著性差異(P＜0.05)，同時(shí)正常組與低免疫對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型可以降低大腦額葉皮質(zhì)中P物質(zhì)含量，玉屏風(fēng)散的治療和預(yù)防干預(yù)可以升高衛(wèi)氣虛模型腦組織中的P物質(zhì)含量。低免疫對(duì)照組較正常組陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)低，提示腦組織中

9、的P物質(zhì)改變與免疫狀態(tài)相關(guān)。各組大腦額葉皮質(zhì)中皆可見棕黃色TUNEL陽性細(xì)胞染色區(qū)域，其中衛(wèi)氣虛模型組TUNEL陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)較正常組增加，有非常顯著性差異(P＜0.01)，模型預(yù)防組TUNEL陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)較衛(wèi)虛組減少，有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛變化可促進(jìn)腦組織細(xì)胞的凋亡，而玉屏風(fēng)散則可遏制此種變化。 結(jié)論：通過寒熱交替刺激制作的衛(wèi)氣虛模型具有免疫力低下的特征，符合衛(wèi)氣虛的微觀辨證特點(diǎn)，同時(shí)發(fā)生了神經(jīng)傳導(dǎo)功能的改變，

10、包括坐骨神經(jīng)中NGF的降低，皮膚及腦組織中P物質(zhì)的減少以及腦細(xì)胞凋亡的增加，說明衛(wèi)氣虛證候，不僅有著免疫功能的低下，也有神經(jīng)系統(tǒng)功能的改變，證明了衛(wèi)氣除了共識(shí)的衛(wèi)外免疫功能外還具有感應(yīng)傳導(dǎo)信息的功能，衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導(dǎo)相關(guān)。益氣固表的玉屏風(fēng)散不僅能夠改善低下的免疫力從而治療衛(wèi)氣虛之證，還能通過影響血清及坐骨神經(jīng)中NGF水平，影響皮膚及腦組織中P物質(zhì)的含量以及腦組織中的細(xì)胞凋亡等途徑來改善衛(wèi)氣虛所致的感應(yīng)傳導(dǎo)障礙。預(yù)防性地使用玉屏風(fēng)散較玉屏風(fēng)