蛙神經(jīng)肌肉標(biāo)本的制備及刺激與肌肉收縮的關(guān)系

1、蛙神經(jīng)-肌肉標(biāo)本的制備及刺激與肌肉收縮的關(guān)系,李濤Tel:13867976203/666049Email:litao@zjnu.cn,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.觀察給予不同強(qiáng)度刺激時(shí)骨骼肌的收縮情況，驗(yàn)證刺激強(qiáng)度與肌肉收縮的關(guān)系。2.觀察剌激頻率與收縮形式之間的關(guān)系，了解單收縮和強(qiáng)直收縮。,二、實(shí)驗(yàn)原理,坐骨神經(jīng)是由多條神經(jīng)纖維組成的神經(jīng)干，神經(jīng)干中各組成纖維的興奮性有所不同。剛剛引起肌肉收縮所需的刺激強(qiáng)度稱為閾刺激強(qiáng)度。隨著刺激強(qiáng)

2、度的增加，坐骨神經(jīng)干中發(fā)生興奮的纖維數(shù)目隨之增多，肌肉收縮的幅度也隨之增大。當(dāng)神經(jīng)干中的全部纖維都發(fā)生興奮時(shí)，所需的最低刺激強(qiáng)度稱為最大刺激強(qiáng)度。閾刺激強(qiáng)度至最大刺激強(qiáng)度之間的刺激稱為閾上刺激強(qiáng)度。超過最大強(qiáng)度的刺激，神經(jīng)所支配肌肉的收縮幅度不再增強(qiáng)。,二、實(shí)驗(yàn)原理,肌肉組織對(duì)于一個(gè)閾上強(qiáng)度的刺激發(fā)生一次迅速的收縮反應(yīng)，稱為單收縮。兩個(gè)同等強(qiáng)度的閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本，如果刺激間隔小于單收縮的時(shí)程，則出現(xiàn)兩個(gè)收縮反應(yīng)的

3、重疊，稱為收縮的總和。 強(qiáng)直收縮：不完全強(qiáng)直收縮；完全強(qiáng)直收縮,,,三、試劑與器材,蛙、計(jì)算機(jī)、MedLab生物信號(hào)處理系統(tǒng)、解剖針、手術(shù)剪、圓頭手術(shù)鑷、尖頭手術(shù)鑷、玻璃勾針、蛙板、肌槽、連接導(dǎo)線、張力換能器、刺激輸出線、任氏液、棉花、棉線、燒杯。,神經(jīng)—肌肉標(biāo)本（自己制備）在神經(jīng)上施加電刺激準(zhǔn)確記錄骨骼肌張力,,借助Medlab,四、實(shí)驗(yàn)步驟,1.材料和方法 (Materials and methods ),實(shí)驗(yàn)動(dòng)

4、物（laboratory animal) 蟾蜍（中華蟾蜍指名亞種，Zhuoshan Toad）,雄性蟾蜍皮膚光滑，前肢趾上有黑色婚墊，會(huì)鳴叫。雌性蟾蜍皮膚粗糙，無婚墊，不會(huì)鳴叫。,婚墊,,雄蟾,雄蟾,雌蟾,1.破壞腦和脊髓,！判斷腦脊髓破壞成功的標(biāo)準(zhǔn)　四肢肌肉松軟，呼吸消失。,圖1-1 破壞蟾蜍腦脊髓的方法,2.剪除軀干上部及內(nèi)臟,！注意勿損傷脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)。,圖1-2 剪除軀干上部及內(nèi)臟,3.剝皮,！注意保護(hù)脊柱兩側(cè)的坐骨

5、神經(jīng)束，鑷子不要夾住坐骨神經(jīng)。,圖1-3剝掉后肢皮膚,將標(biāo)本放入盛有任氏液燒杯中，不能用自來水清洗標(biāo)本洗凈手及用過的剪刀、鑷子等全部手術(shù)器械。,任氏液由無機(jī)鹽和蒸餾水配置而成，每升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。任氏液的理化特性與蛙的組織液近似。可用于蛙的組織、器官潤濕和營養(yǎng)。,4.分離兩腿,！注意不可剪歪，以防坐骨神經(jīng)損傷,圖1-4分

6、離坐骨神經(jīng),5.分離坐骨神經(jīng),！玻璃針鈍性分離！忌用金屬器械觸、夾神經(jīng)，防止過度牽拉神經(jīng)。！用任氏液保持神經(jīng)濕潤。,5.坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本,圖1-5坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本,6.儀器標(biāo)本連接將張力換能器固定在鐵支架上，肌肉標(biāo)本的股骨固定于支架下端，腓腸肌跟腱的結(jié)扎線連于張力換能器的受力片上，連線應(yīng)松緊適宜，并與桌面垂直，張力換能器的輸入端接Medlab系統(tǒng)的1通道插座。把穿好線的坐骨神經(jīng)輕輕提起，放在刺激電極上或?qū)⒋碳る姌O與肌肉