實(shí)驗(yàn)一、槐米中蘆丁的提取、分離和鑒定

1、實(shí)驗(yàn)一槐米中蘆丁的提取、分離和鑒定一、概述槐米系豆科植物槐樹（SophajaponicaL.）的花蕾（槐米）。具有清熱、涼血、止血的功效，用于治療便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，風(fēng)熱目赤，痛疽瘡毒，還可用于預(yù)防中風(fēng)。近年來被用作治療高血壓的輔助藥物。藥理實(shí)驗(yàn)證明，槐花米具有調(diào)節(jié)毛細(xì)血管的滲透作用，抗炎作用，解痙、抗?jié)n瘍作用，影響脂質(zhì)代謝，抗菌等多種生物活性。槐花米中主要含有黃酮苷，皂苷、甾醇和鞣質(zhì)等成分，其中蘆丁(Rutin)含

2、量最高，達(dá)12～20%。主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)：蘆?。╮utin）：C27H30O163H2O，淺黃色針狀結(jié)晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（無水物）。難溶于冷水（1：8000～10000），可溶于熱水（1：180～200），熱甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），熱乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；難溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于堿液。槲皮素（quercetin）：C15H10O72

3、H2O，黃色結(jié)晶，mp313～314℃（2分子結(jié)晶水），316℃（無水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；難溶于水、苯、石油醚等溶劑。二、實(shí)驗(yàn)部分（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、通過蘆丁的制備，掌握黃酮類化合物提取分離的原理和操作。4、鑒別反應(yīng)（1）稱槲皮素重量，計(jì)算水解率。（2）薄層色譜鑒定樣品：自制蘆丁及槲皮素的1mgml甲醇溶液。（每組稱取20mg）對(duì)照品：蘆丁及槲皮素對(duì)照品的

4、1mgml甲醇溶液。展開劑：90%乙醇溶液顯色：噴三氯化鋁溶液，紫外光（365nm）觀察熒光。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄：觀察斑點(diǎn)顏色，記錄圖譜并計(jì)算Rf值。（3）顯色反應(yīng)①M(fèi)olish反應(yīng)：取蕓香苷及槲皮素樣品分別1ml，加入3%α萘酚溶液1滴，振搖，沿壁滴加濃硫酸1ml，觀察現(xiàn)象。②鹽酸鎂粉反應(yīng)：分別取樣品1ml，加入濃鹽酸23滴，再加入少許鎂粉，觀察現(xiàn)象。③紙片反應(yīng)：取一張濾紙，分別滴加樣品1滴，在上面再滴加三氯化鋁溶液1滴，觀察現(xiàn)象。（同理，

5、再用醋酸鎂顯色）（五）注意事項(xiàng)1、提取時(shí)控制小火加熱，微沸即可。2、加熱完成后要放冷抽濾。3、用石灰水調(diào)節(jié)蘆丁提取溶液的PH，既可以達(dá)到堿提取蘆丁的目的，還可以除去槐米中含有的大量粘液質(zhì)。但鈣離子濃度及pH值均不宜過高，否則多余的鈣能與蘆丁形成螯合物沉淀，同時(shí)黃酮母核在強(qiáng)堿性條件下易被破壞。4、用HCl調(diào)PH時(shí)，應(yīng)注意PH不要過低，因?yàn)镻H過低（PH2以下）會(huì)使蘆丁形成钅羊鹽而使已形成的沉淀重新溶解，同時(shí)黃酮母核也會(huì)在強(qiáng)堿性條件下被破壞