激光去除根管內(nèi)玷污層及對體外糞腸球菌生物膜殺菌效果的研究.pdf

1、根管治療高質(zhì)量地完成根管預(yù)備和根管消毒是實現(xiàn)有效控制感染的前提，然而在根管預(yù)備的過程中，由于根管系統(tǒng)的復(fù)雜性及器械預(yù)備的局限性，根管中會有大部分區(qū)域未預(yù)備到，特別是根尖1/3處，存在側(cè)枝根管，管間交通，根管峽區(qū)，根尖分叉，根尖分歧等復(fù)雜的解剖結(jié)構(gòu)，碎屑及細菌很容易堆積在這些部位形成玷污層，而傳統(tǒng)的沖洗技術(shù)作用較表淺，僅能去除根上、根中段的玷污層，而根尖1/3處的玷污層很難去除。近年來，激光作為一種新型的輔助沖洗的工具已被用于臨床，它在去

2、除玷污層方面有一定的效果，但其結(jié)合的沖洗劑種類和作用時間不盡相同，因此本論文第一個部分研究Er,Cr:YSGG激光和Er:YAG激光結(jié)合不同沖洗劑作用不同時間去除玷污層的效果。
　　細菌及其副產(chǎn)物是牙髓和根尖周疾病的主要病因，根管治療術(shù)的核心思想是感染控制，既要徹底去除根管內(nèi)感染，又要杜絕再感染。然而據(jù)報道根管治療的成功率為85％-90%，根管治療失敗的主要原因之一是持續(xù)性根尖周炎的存在，糞腸球菌常從持續(xù)性根尖炎及治療失敗的患牙中

3、檢出，它是一種革蘭陽性兼性厭氧球菌，它們能彼此黏附到一起，且侵入牙本質(zhì)小管，形成糞腸球菌生物膜，而且它能忍受長期營養(yǎng)缺乏條件的限制，且能抵抗沖洗劑和根管封藥的影響，目前常使用NaOCl作為沖洗劑消毒，然而它只能滲入到牙本質(zhì)小管內(nèi)130μm，對于更深層的細菌作用不到。近年來，多種激光用于輔助根管消毒，如Er,Cr:YSGG激光，Er:YAG激光，Nd:YAG激光，Diode激光，aPDT等，以往文獻報道它們都能以直接或間接方式殺菌，且對牙

4、本質(zhì)小管深層的細菌有一定的效果，但對于其殺菌效果報道不一，因此本論文第二個部分是比較五種激光的殺菌效果。實驗共分為以下兩個部分：
　　第一部分 Er:YAG激光和Er,Cr:YSGG激光活化沖洗去除根管玷污層的研究
　　實驗一根管玷污層模型的建立
　　本實驗先收集人離體單根牙，在體外通過模仿臨床根管預(yù)備的過程，使用 M3機用鎳鈦器械并采用冠向下預(yù)備的方法預(yù)備根管至35＃/04錐度，換銼期間使用0.5%NaOCl沖洗，后

5、于掃描電鏡下觀察，結(jié)果表明玷污層模型建立成功。
　　實驗二 Er:YAG激光和Er,Cr:YSGG激光活化沖洗對根管玷污層去除效果的研究
　　本實驗在實驗一玷污層模型建立的基礎(chǔ)上，選取90個人離體單根牙，依據(jù)終末沖洗方式不同，分為9組，A：5.25%NaOCl，B：Er:YAG+5.25%NaOCl， C：Er,Cr:YSGG+5.25%NaOCl，D：17%EDTA，E：Er:YAG+17%EDTA， F：Er,Cr:YS

6、GG+17%EDTA，G：5.25%NaOCl+17%EDTA， H：Er:YAG+5.25%NaOCl+17%EDTA，I：Er,Cr:YSGG+5.25%NaOCl+17%EDTA；
　　每組各作用60s，處理完后于掃描電鏡下觀察并使用評分標準進行評分，后行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果 Er:YAG激光和 Er,Cr:YSGG激光顯著增強了 NaOCl、EDTA及NaOCl+EDTA去除玷污層的作用(P＜0.05)。去玷污層有效性由強到弱

7、的方法是LAI+NaOCl+EDTA, LAI+EDTA>LAI+NaOCl, NaOCl+EDTA>EDTA>NaOCl。結(jié)論：在所有的處理組中，LAI+NaOCl+EDTA是最有效地能去除整個根管壁玷污層的方法，而又以Er:YAG+NaOCl+EDTA的效果最佳，以期提高根管治療的成功率。
　　第二部分五種激光對體外糞腸球菌生物膜殺滅效果的研究
　　實驗一牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌生物膜模型的建立
　　本實驗使用人離體單

8、根牙釉牙骨質(zhì)界下4mm牙本質(zhì)段，制備4×4×2mm3牙本質(zhì)片，使用5.25%NaOCl和17%EDTA在超聲水浴去除玷污層，后行高壓蒸汽滅菌，然后使用掃描電鏡觀察玷污層去除及滅菌情況，然后植入糞腸球菌，培養(yǎng)3周，行掃描電鏡觀察糞腸球菌模型是否建立，然后隨機選取其它樣本行活死菌染色，后立即置于激光共聚焦顯微鏡觀察，并行三維重建，SEM和CLSM結(jié)果表明糞腸球菌模型建立成功。
　　實驗二激光共聚焦觀察NaOCl對牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌生

9、物膜的殺菌效果
　　在實驗一糞腸球菌模型建立的基礎(chǔ)上，隨機選擇樣本，分為四組分別是5.25%NaOCl處理1、3、5、10min，然后使用活死菌染液對細菌生物膜進行染色，立即置于CLSM下觀察，然后行三維重建，并使用 Image-Pro-Plus軟件計算死菌的比例，結(jié)果：隨NaOCl作用時間延長，殺菌效果增強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)論：5.25%NaOCl作用10min，殺菌效果最好。
　　實驗三激光共聚焦觀察

10、五種激光對牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌生物膜的殺菌效果
　　體外按照實驗一的方法建立糞腸球菌感染牙本質(zhì)小管模型，隨機分為6組：A組：5.25%NaOCl，B組：Nd:YAG激光，C組：Diode激光，D組：Er,Cr:YSGG/NaOCl， E組：Er：YAG/NaOCl，F(xiàn)組：Nd:YAP/NaOCl，每組作用時間1、3min，然后行活死菌染色，并立即置于CLSM下觀察，后行三維重建，并使用 Image-Pro-Plus軟件計算死菌所占

11、的比例，結(jié)果：Er,Cr:YSGG，Er:YAG，Nd:YAP激光能顯著增強NaOCl的殺菌效果（P＜0.05），Er,Cr:YSGG/NaOCl及Er:YAG/NaOCl殺菌效果無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；Nd:YAG激光和Diode激光殺菌效果相當（P＞0.05），激光活化組殺菌率高于激光直接照射組（ P＜0.05），殺菌效果由強到弱的排序為 Er:YAG/NaOCl， Er,Cr:YSGG/NaOCl>Nd:YAP/NaOCl＞