凝溶膠蛋白對胃癌細胞的影響【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　食品質(zhì)量與安全</b></p><p>　　凝溶膠蛋白對胃癌細胞的影響</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　真核細胞的細胞骨架由微管、微絲和中間纖維構(gòu)成。肌動蛋白(actin)是微絲的主要構(gòu)

2、成成分。微絲參與細胞形態(tài)和極性的維持、內(nèi)吞作用、胞內(nèi)運輸、細胞收縮及運動、細胞分裂等眾多功能。而肌動蛋白結(jié)合蛋白(actin binding proteins，ABPs)則在肌動蛋白纖絲聚合及解聚的動態(tài)變化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。紐蟲的體壁肌肉中含有大量的肌動蛋白和凝溶膠蛋白。凝溶膠蛋白(gelsolin)則是一種重要的肌動蛋白結(jié)合蛋白，最早于1979 年由Yin和Stossel在兔肺巨噬細胞中發(fā)現(xiàn)，證實其能以鈣依賴的方式調(diào)節(jié)肌動蛋白的重

3、組，促使細胞質(zhì)gel-sol的相互轉(zhuǎn)換。Gelsolin通過對微絲的剪切、封端和成核作用，來實現(xiàn)對細胞微絲骨架的動態(tài)調(diào)節(jié)，推測過表達的gelsolin可以通過調(diào)控神經(jīng)細胞內(nèi)肌動蛋白網(wǎng)絡來影響軸突的起始、發(fā)生、伸長和樹突的形成，從而增加神經(jīng)元的長度，加快神經(jīng)元的生長，從而促進外傷、截肢等患者的離斷神經(jīng)的修復。</p><p>　　另外，推測gelsolin對肌肉的收縮和肌原纖維的裝配起重要作用。成肌纖維細胞(myo

4、fibroblast)是傷口愈合和各種組織纖維化中起主要作用的細胞，成肌纖維細胞不能及時從病變處退出，使細胞外基質(zhì)持續(xù)過量分泌，并發(fā)生重塑是組織纖維化的主要特征。Actin作為肌肉細胞的一個重要的收縮蛋白，也是構(gòu)成細胞骨架的主要成分，其表達量的多少能直接反應成肌纖維細胞的分化、增值及凋亡情況，而gelsolin又在肌動蛋白纖絲聚合及解聚的動態(tài)變化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用，因此研究gelsolin對成肌纖維細胞的功能性作用具有重要的理論意義，

5、通過分子生物學技術阻斷其分化、增殖的信號通路及基因轉(zhuǎn)錄，通過藥物或重組蛋白促進成肌纖維細胞的凋亡，抑制其分化和增殖，促其恢復轉(zhuǎn)化前細胞表型，從而阻斷纖維化進程，根治組織纖維化疾病。</p><p>　　無序生長和高遷移能力是轉(zhuǎn)移性癌細胞的重要特征，而這兩個過程都涉及到細胞肌動蛋白骨架的解聚與重排，而gelsolin作為胞質(zhì)內(nèi)重要的actin調(diào)節(jié)蛋白也與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有著密切的關系。已報道gelsolin在人類多

6、種惡性腫瘤中表達明顯降低，其表達水平與腫瘤大小、侵襲性生長等密切相關，如在人膀胱癌中，gelsolin在6個膀胱癌細胞系和77.8%的膀胱癌組織中表達缺失和明顯降低。在乳腺癌中，gelsolin在乳腺癌細胞系中缺失或明顯低于正常人乳腺上皮細胞和良性永生化細胞的表達水平。人們對gelsolin在腫瘤中表達明顯降低的現(xiàn)象進一步進行了深入研究，發(fā)現(xiàn)將外源gelsolin cDNA全長轉(zhuǎn)入癌細胞系過表達后，可抑制腫瘤細胞的生長，降低腫瘤細胞的集

7、落形成能力和裸鼠致瘤性。這些實驗證據(jù)提示gelsolin具有明顯的腫瘤抑制作用。</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p>　　1、胃癌細胞的培養(yǎng)。</p><p>　　2、重組凝溶膠蛋白的誘導表達、Ni柱純化和冷凍干燥。</p><p>　　3、凝溶膠蛋白對胃癌細胞功能性作用和作用的機制的研究，包括：<

8、;/p><p>　　凝溶膠蛋白對胃癌細胞形態(tài)變化的影響</p><p>　　對細胞遷移運動情況的影響</p><p>　　對胃癌細胞有絲分裂情況的影響。</p><p>　　三、研究的方法與技術路線：</p><p>　　四、總體安排與進度：</p><p>　　2010.10-2010.11：查閱

9、文獻，了解實驗總體步驟與方法。</p><p>　　2010.11-2010.12：重組凝溶膠蛋白的制備；以及胃癌細胞的培養(yǎng)。</p><p>　　2010.12-2011.03：凝溶膠蛋白對胃癌細胞的影響。</p><p>　　2011.03-2011.05：對整個試驗的補充、完善階段，論文的撰寫。</p><p><b>　　五

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