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文檔簡介
1、目的:探究鐵過載對胃癌MKN-45和SGC-7901細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響及其相關(guān)機(jī)制,以期為胃癌的預(yù)防和治療提供可能的理論依據(jù)。
方法:將胃癌MKN-45和 SGC-7901細(xì)胞暴露于不同濃度的硫酸亞鐵(0,50,100,200μM),其中“0μM”處理組作為空白對照組,處理時間為24 h。使用CCK-8法檢測不同濃度硫酸亞鐵對胃癌 MKN-45和 SGC-7901細(xì)胞增殖的影響;采用Transwell法檢測不同濃度硫酸亞
2、鐵對胃癌MKN-45和SGC-7901細(xì)胞侵襲能力的影響;采用 Western blot方法檢測不同濃度硫酸亞鐵對胃癌 MKN-45和SGC-7901細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白激-9(Matrix metalloproteinase-9。MMP-9)。c-Myc,胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Extracellular signal-regulatedKinase1/2。total-ERK1/2)及p-ERK1/2表達(dá)的影響。ELISA方法檢測不同濃度硫酸亞
3、鐵對胃癌 MKN-45和SGC-7901細(xì)胞白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6。IL-6)表達(dá)的影響;使用ERK1/2特異性抑制劑(U0126)阻斷ERK1/2信號通路,以進(jìn)一步驗(yàn)證ERK1/2通路的活化是否參與了鐵過載促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖和侵襲的過程,以及確定MMP-9。c-Myc及IL-6是否為ERK1/2信號通路下游的效應(yīng)分子。
結(jié)果:CCK-8實(shí)驗(yàn)表明相比于空白對照組,其他實(shí)驗(yàn)組反映胃癌MKN-45和SGC-790
4、1細(xì)胞增殖能力的OD值明顯增加,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Transwell實(shí)驗(yàn)表明相比于空白對照組,其他實(shí)驗(yàn)組侵襲穿透至下室的胃癌細(xì)胞數(shù)明顯增多,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Western blot顯示硫酸亞鐵促進(jìn)了胃癌MKN-45和SGC-7901細(xì)胞MMP-9。c-Myc以及p-ERK1/2的表達(dá);ELISA檢測顯示硫酸亞鐵促進(jìn)了胃癌MKN-45和SGC-7901細(xì)胞IL-6的表達(dá)。ERK1/2特異性抑制劑可逆轉(zhuǎn)硫酸亞鐵對胃癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的促
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