鵝血蛋白組分對胃癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、胃癌(Gastric cancer，GC)為世界上多發(fā)的消化方面惡性腫瘤，給人民身心健康帶來了巨大危害。胃癌的全世界惡性腫瘤發(fā)病率及死亡率的排名仍然處于前列。近幾年，我國惡性腫瘤中胃癌的發(fā)病率及死亡率均處于第三位，給社會和家庭帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。進(jìn)展期胃癌的生存率低，可能與醫(yī)治中的并發(fā)癥、毒副作用和耐藥性等方面有關(guān)。所以探尋毒性低、效果顯著的抗腫瘤藥值得期待。
　　臨床上普遍使用的一些抗腫瘤中藥，毒性低且效果顯著。植物藥抗腫瘤的

2、主要成分經(jīng)證實通常是多糖、短肽及黃酮類等化合物；而動物藥的主藥成分為短肽，包括毒素和抗菌肽（Antimicrobial peptides，AMPs），毒素的作用機(jī)制主要為通過短肽誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時動物體內(nèi)分泌的多種抗菌肽具有抑制細(xì)胞生長的效果。因此，從已知中藥出發(fā)，分離其中有效活性成分來研發(fā)安全高效的抗腫瘤藥物潛力巨大。
　　鵝血(Goose blood)屬于中醫(yī)動物藥范疇，是中醫(yī)治療胃癌常用的成分之一。由于尚無鵝血醫(yī)治胃癌的正式

3、文獻(xiàn)報道，因此我們擬觀察鵝血有效組分中多肽和蛋白質(zhì)對胃癌細(xì)胞體外增殖的影響。
　　目的：探討鵝血有效蛋白組分對胃癌細(xì)胞增殖的影響，并通過質(zhì)譜鑒定初步了解鵝血有效組分的多肽和蛋白組成及其功能。
　　方法：
　　1.取鵝血清，使用30 kD和10 kD超濾管分級分離鵝血有效成分，再取部分10 kD鵝血有效成分，進(jìn)一步使用3 kD超濾管分離鵝血中小分子多肽成分，并對鵝血各組分中蛋白定量分析。
　　2.取培養(yǎng)獲得的處于對

4、數(shù)生長期的人胃癌細(xì)胞株HGC-27和SGC-7901備用，分別加入各組鵝血蛋白組分、陽性對照化療藥5-FU、空白對照作用36小時后，用MTS法算出鵝血各蛋白分組的生長抑制率。
　　3.對有效鵝血蛋白組分溶液內(nèi)酶解20小時后，采集和分析提取出的酶解多肽，質(zhì)譜鑒定有效鵝血蛋白組分的構(gòu)成。
　　結(jié)果：
　　1.鵝血蛋白各分組都具有抑制人胃癌細(xì)胞株的效果，各分組間效果不同。
　　2.30 kD組和10 kD組均表現(xiàn)良好的

5、抑制效果，較3 kD組作用更加顯著，其中10 kD組的生長抑制率分別為41.37％±5.94%（P<0.05）和12.05%±9.03%（P<0.05）；與陽性對照的化療藥5-FU組的生長抑制率65.46%±10.40%（P<0.05）和78.27%±4.08%（P<0.05），其作用稍弱。結(jié)果提示，鵝血清中起作用的蛋白組分大多集中在10 kD組。
　　3.10 kD組10倍稀釋后，其對胃癌細(xì)胞的生長抑制作用效果不夠明顯，表明其作

6、用方式比較溫和。
　　4.質(zhì)譜分析鵝血清中10 kD組，以進(jìn)一步了解可能起作用的蛋白組分。質(zhì)譜分析的結(jié)果表明，共獲得135個蛋白或多肽，其中功能已知的蛋白為60個，與其他物種有類似功能結(jié)構(gòu)域的蛋白48個和未知蛋白27個，參照物種相近的綠頭鴨（ Anas platyrhynchos）的基因信息獲取鵝血大部分蛋白或多肽序列。通過質(zhì)譜獲得的所有蛋白的氨基酸數(shù)目在43~3201個之間，其中小于130個氨基酸的有19個蛋白或多肽。該組分獲得