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文檔簡介
1、本研究以分布在全國的113個大豆栽培品種和20個野生品種為材料,利用SRAP分子標記技術(shù)研究其親緣關(guān)系與遺傳多樣性,用凱氏定氮法測定其蛋白含量,為大豆的品種鑒定、種質(zhì)資源保護、雜交親本選擇、分子標記輔助育種和開發(fā)利用提供理論和技術(shù)依據(jù)。 主要內(nèi)容結(jié)果如下: 1、建立了大豆的SRAP反應程序及體系。反應程序為:94℃預變性3 min,然后前5個循環(huán)為94℃變性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1 min,后35個
2、循環(huán)僅將退火溫度升為50℃,最后72℃延伸7 min。擴增反應總體積為25μL,包括:1×buffer緩沖液,2.0 mmol/LMg2+,0.5μmol/L引物,250μmol/L,30 ng模板DNA和1.5U TaqDNA聚合酶?;谏鲜鲶w系,從288對引物組合中篩選出12對SRAP引物組合,對113個大豆品種和20個野生品種進行擴增,共擴增出251條譜帶,其中多態(tài)性條帶220條,多態(tài)性譜帶比率為87.6%,等位基因數(shù)為1.904
3、4,有效等位基因數(shù)1.4796,期望雜合度為0.2874,Shannon多樣性為0.4375。根據(jù)133個大豆品種的Nei相似系數(shù)計算的遺傳距離,進行聚類分析,繪制樹狀圖。在遺傳距離0.300處,將133個品種劃分為2個類群。其中20中野生品種“陽谷短絨野生豆”、“野07-1”、“野07-2”、“野020312”、“野020137”、等聚為一類(A),其余的栽培品種歸為一類(B)。栽培品種中又分為兩類,其中“豫豆25”、“豫豆27”、“
4、豫豆16”、“豫豆17”、“豫豆18”、“豫豆13”、“周89①-6-4”、“豫豆8號”、“豫豆10”、“鄭9525”、“豫豆26”、“豫豆21”、“豫豆22”、“中作983”、“豫豆20”等河南的主栽大豆品種聚為了一類(C);“中豆27”、“淮陰92-34”、“中黃13”、“中豆8號”、“淮陰87-22”、“科豐36”、“中黃17”、“新六青”、“徐豆9號”、“泗豆280”、“皖豆16”、“MN413”等安徽蘇州其他省份的品種歸為了一
5、大類(D)。 2、測定了113個大豆栽培品種和20個野生大豆品種的蛋白含量,野生大豆的蛋白含量在49%-54%之間,均為高蛋白大豆,而栽培大豆的蛋白含量在36%-51%之間,既有高蛋白品種,又有低蛋白品種,從中篩選出高蛋白大豆材料。方差分析顯示,品種間蛋白含量表現(xiàn)為極顯著差異(P<0.01),具有明顯的多態(tài)性。 3、比較113個栽培大豆和20個野生大豆的SRAP聚類與蛋白含量聚類發(fā)現(xiàn)兩者均把野生大豆聚為一類,而栽培大豆聚
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