大豆疫霉菌毒力及遺傳多樣性分析.pdf

1、由Phytophthora sijae引起的大豆疫霉根腐病是大豆上的一種毀滅性病害，自上世紀(jì)90年代初在我國(guó)東北地區(qū)發(fā)現(xiàn)該病害以來，其危害面積逐年增加，危害日益嚴(yán)重。近年的調(diào)查表明，大豆疫霉根腐病在我國(guó)9省(自治區(qū))均有發(fā)生，其中在東北和黃淮大豆產(chǎn)區(qū)較為嚴(yán)重。 本研究主要包括以下四個(gè)方面： 1.采用改進(jìn)的葉碟誘釣法對(duì)我國(guó)黑龍江省、河南省、安徽省、湖北省及新疆維吾爾自治區(qū)共計(jì)25個(gè)市(縣或國(guó)營(yíng)農(nóng)場(chǎng))的79份大豆田土壤樣品進(jìn)

2、行病原菌的分離，其中18份土壤分離到大豆疫霉，分別為來自黑龍江省的6份、河南省的2份、安徽省的3份、新疆自治區(qū)7份土壤樣品；未從來自湖北省的土壤樣品中分離到大豆疫霉菌。 2.對(duì)81個(gè)大豆疫霉菌菌株進(jìn)行毒力鑒定，結(jié)果表明我國(guó)大豆疫霉菌的毒力結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜。來源于不同地區(qū)、同一地區(qū)的不同地塊以及同一地塊的菌株之間都存在明顯的毒力差異。81個(gè)分離物共產(chǎn)生56個(gè)毒力型。將鑒定得到的毒力型與國(guó)外已經(jīng)報(bào)道的生理小種反應(yīng)型比較，沒有發(fā)現(xiàn)相同的，

3、均為新發(fā)現(xiàn)的反應(yīng)型。毒力聚類分析表明黑龍江的菌株毒力變異較大，分散在4個(gè)組中。安徽菌株毒力變異范圍較小，10個(gè)菌株分布于相似系數(shù)為0.832的同一亞組中。 3.利用本實(shí)驗(yàn)分離的81個(gè)菌株和實(shí)驗(yàn)室保存的22個(gè)菌株共103株大豆疫霉菌進(jìn)行基因組DNA的AFLP分析。采用選擇性擴(kuò)增引物的選擇性堿基數(shù)目為“2+2”，首先用6個(gè)地區(qū)來源不同，毒力類型相差較大的菌株對(duì)80引物進(jìn)行篩選，再選用擴(kuò)增效果好、多態(tài)性高的25個(gè)引物對(duì)103菌株進(jìn)行分

4、析。利用數(shù)據(jù)分析軟件NTSYS-PC 2.1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與聚類分析。結(jié)果表明供試菌株可劃分7組。AFLP分組與菌株的地理分布之間有一定的相關(guān)性。安徽、新疆、河南的菌株地區(qū)內(nèi)遺傳距離較小，其它地區(qū)遺傳距離較大。 4.采用下胚軸傷口接種法，選取7株毒力型不同的新疆地區(qū)菌株對(duì)19個(gè)新疆主載大豆品種(品系)進(jìn)行抗病性鑒定。結(jié)果表明在新疆，大豆疫霉菌對(duì)已知抗病基因Rps1a、Rps1d、Rps2、Rps3c、Rps4、Rps5、Rps6、