Gy1-Gy7嵌合基因表達載體轉(zhuǎn)化煙草的研究及大豆胚尖法再生體系的改良.pdf

1、大豆起源于中國，是重要的農(nóng)作物和經(jīng)濟作物。其品質(zhì)育種是大豆育種的重要目標(biāo)。雖然依靠常規(guī)育種技術(shù)已選育出大量的優(yōu)質(zhì)大豆品種，但是隨著經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活質(zhì)量的提高，對大豆的品質(zhì)提出了更高的要求，通過基因工程育種改良大豆遺傳性狀，使其具有更高的營養(yǎng)價值和經(jīng)濟價值，已成為當(dāng)今大豆遺傳育種研究的熱點。本文首先對目前利用常規(guī)育種和基因工程育種對大豆品質(zhì)改良的研究進展進行了綜述。 大豆含有豐富的蛋白質(zhì)，是世界上重要的植物蛋白來源。其中大豆球

2、蛋白方面的研究受到人們的重視。11S大豆球蛋白是大豆貯藏蛋白的重要成分，目前已發(fā)現(xiàn)六種有功能的大豆球蛋白，G1、G2、G3、G4、G5和G7，編碼這些大豆球蛋白的基因家族分別是Gy1、Gy2、Gy3、Gy4、Gy5和Gy7。在六種有功能的大豆球蛋白中，通過分析比較重要氨基酸含量發(fā)現(xiàn)，Gy7基因編碼合成的G7大豆球蛋白含有最高的賴氨酸含量和含硫氨基酸含量，是目前已發(fā)現(xiàn)的優(yōu)質(zhì)大豆球蛋白基因。 本文將實驗室已構(gòu)建的兩種表達載體pCAM

3、BIA1301-Gy1-Gy7-NOS和pCAMBIA1301-Gy1-Gy7cDNA—NOS采用葉盤法分別轉(zhuǎn)化煙草革新1號。經(jīng)抗性篩選、分化和生根各獲得轉(zhuǎn)基因植株30和33棵，對T0代轉(zhuǎn)基因植株進行PCR及PCR Southern檢測結(jié)果顯示，單轉(zhuǎn)Gy7基因的轉(zhuǎn)基因后代中有12棵呈現(xiàn)陽性，單轉(zhuǎn)Gy7cDNA基因的后代中有13棵呈現(xiàn)陽性。試驗結(jié)果表明，Gy7和Gy7cDNA基因已成功轉(zhuǎn)入煙草中，并能夠正常表達。本實驗為以后利用兩種表達載