農(nóng)桿菌介導的大豆胚尖轉(zhuǎn)基因體系的建立及優(yōu)化.pdf

1、大豆作為人類最重要的作物之一，是植物油和植物蛋白等營養(yǎng)素的主要來源。轉(zhuǎn)基因大豆對于提高大豆產(chǎn)量、品質(zhì)和降低生產(chǎn)成本具有重要意義。世界上已經(jīng)有75％的大豆為轉(zhuǎn)基因大豆，但中國轉(zhuǎn)基因大豆的培育仍處于初級階段。我國大豆轉(zhuǎn)基因研究的技術(shù)瓶頸是轉(zhuǎn)化技術(shù)，本研究旨在建立高效、穩(wěn)定的大豆轉(zhuǎn)基因體系。
　　 本研究通過分析及優(yōu)化影響大豆胚尖轉(zhuǎn)化的多種因素，建立了系統(tǒng)的農(nóng)桿菌介導的大豆胚尖轉(zhuǎn)基因體系，并運用該體系對具較好轉(zhuǎn)基因效率的5個大豆品種進

2、行了侵染效率、再生效率和轉(zhuǎn)化效率比較。其次，本研究利用實驗室已有的高效且穩(wěn)定的農(nóng)桿菌介導的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)基因體系，在3個基因型中研究了編碼可抑制組培過程中乙烯產(chǎn)生的1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸鹽脫氨酶(ACDS)的acdS基因?qū)Υ蠖罐D(zhuǎn)化的影響。最后，在轉(zhuǎn)基因材料的培育過程中，建立了溫室、田間草甘膦抗性鑒定體系，并且優(yōu)化了溫室轉(zhuǎn)基因大豆的土壤培養(yǎng)條件。
　　 通過實驗發(fā)現(xiàn)，目前已建立的農(nóng)桿菌介導的大豆胚尖轉(zhuǎn)基因體系轉(zhuǎn)化效率穩(wěn)定在1.5-

3、3％的范圍內(nèi)，使用該體系還鑒別出了天隆(一)號為5個基因型中的最優(yōu)品種;同時，在華春3號中證明了acdS基因能夠促進大豆的轉(zhuǎn)化;此外，溫室草甘膦性狀鑒定法確認了1/200(v/v)草甘膦濃度噴灑1次為最佳檢測組合，田間草甘膦性狀鑒定結(jié)果則可推斷出單T-box和單插入基因的載體類型的轉(zhuǎn)基因后代具有較好的遺傳穩(wěn)定性，而溫室土壤培育條件的優(yōu)化則確定了黑土+黃土[1/1(m/m)]為最佳土壤栽培類型。
　　 綜上所述，本研究的成果為以后