利用基因芯片對疏葉駱駝刺幼根耐鹽差異表達基因的研究.pdf

1、以新疆耐鹽豆科植物疏葉駱駝刺為研究對象，對其種子萌發(fā)耐鹽性進行了研究；利用Affymetrix公司的截型苜?；蚪M芯片，包括61278個探針，檢測疏葉駱駝刺幼根在220mmol/LNaCl脅迫處理0h和24h的差異表達基因，利用GO功能注釋對所獲得的差異表達基因進行分析，結合PCR技術設計引物對探針所對應的功能基因在疏葉駱駝刺中進行克??；建立了疏葉駱駝刺的莖段離體快繁體系，為苗期耐鹽性測定奠定基礎。 主要研究結果如下：

2、1.疏葉駱駝刺種子在300mmol/LNaCl濃度以下發(fā)芽率為100％，700mmol/LNaCl濃度仍能萌發(fā)，發(fā)芽率為40％；在400-700mmol/L鹽脅迫下，其發(fā)芽率隨著鹽濃度的升高呈下降趨勢，根長與鹽濃度呈負相關。 2.在61278個探針中，0h檢測到5133個，24h檢測到5378個。差異表達基因246個，其中上調的有147個，下調的有119個。 3.通過GO分析了部分上、下調差異表達基因，差異表達基因主要參

3、與能量代謝、信號傳導、物質運輸、細胞壁合成。 4.利用PCR技術克隆出疏葉駱駝刺FDH基因，其編碼區(qū)總長為840bp(36-875)，編碼280個氨基酸序列。其編碼序列和蛋白質序列與豆科植物百脈根(Lotuscorniculatus)相應序列的同源性分別為91％和90％。 5.疏葉駱駝刺莖段快繁體系：MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+1.5g/LLH，增殖倍數為6.8；LH能促進苗的生長，增加芽分化能力