水稻OsBIANK1和亞硫酸鹽氧化酶基因的功能分析.pdf

1、錨蛋白（ANK）是生命體中一類龐大的類群，研究表明一些錨蛋白參與植物防衛(wèi)反應的調控。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)水稻錨蛋白基因 OsBIANK1在抗病反應中上調表達。為了研究 OsBIANK1在抗病反應中的功能，構建了過量表達載體35S：OsBIANK1，并利用根癌農(nóng)桿菌介導的花序浸蘸法導入擬南芥中，獲得35S：OsBIANK1單拷貝株系，轉代選取3個純合株系（OsBIANK1-OE＃17、＃24和＃29）。比較了野生型、OsBIANK1-OE

2、植株對 Pseudomonas syringae pv.tomato（Pst）DC3000和灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抗病性變化。注射接種 Pst DC3000、活體接種B.cinerea后，OsBIANK1.OE植株上病害顯著輕于野生型。Pst DC3000侵染后，OsBIANK1-OE的 Pst DC3000菌量顯著低于野生型對照。OsBIANK1-OE＃17、＃24和＃29植株中 PR-1和 PR-5基因表達上

3、調；而 B.cinerea侵染后，OsBIANK1-OE植株中 PDF1.2和 BIK1基因表達上調。此外，經(jīng)水楊酸（salicylic acid，SA）和苯并噻二唑（benzothiadiazole，BTH）誘導2天后，再接種 PstDC3000，OsBIANK1轉基因擬南芥植株菌量低于野生型對照，且低于沒有經(jīng) SA和 BTH誘導后的植株。在 B.cinerea侵染后，OsBIANK1-OE植株葉片中僅有少量活性氧積累。這些結果表明，

4、OsBIANK1在擬南芥中對不同類型病害的抗病反應中起正調控作用。
　　 亞硫酸鹽氧化酶（sulfite oxidase，SO）是近幾年在植物中得到證實的一個鉬酶，在植物硫代謝中起著重要的作用，具有亞硫酸鹽解毒功能。近期研究，都集中在 SO基因的生化特性方面，抗病性方面報道至今未見報道。本研究中，我們分離鑒定了水稻中兩個 SO酶基因 OsSO1和 OsSO2。為了研究 OsSO1和 OsSO2在抗病反應中的功能，構建了過量表達載

5、體35S：OsSO1,35S：OsSO2，并利用根癌農(nóng)桿菌介導的花序浸蘸法導入擬南芥中，獲得35S：OsSO1和35S：OsSO2單拷貝株系，轉代選取純合株系（OsSO1-OE＃19、＃23和OsSO2-OE＃4）。比較了野生型、OsSO1-OE、OsSO2-OE植株對 Pst DC3000和 B.cinerea的抗病性變化。注射接種 Pst DC300、活體接種 B.cinerea后，OsSO1-OE和 OsSO2-OE植株上病害顯著

6、輕于野生型。Pst DC300侵染后，OsSO1-OE和 OsSO2-OE的 Pst DC3000菌量顯著低于野生型對照，OsSO1-OE和 OsSO2-OE植株中 PR-1和 PR-5基因表達上調；而活體接種 B.cinerea后，OsSO1-OE和 OsSO2-OE植株中 PDF1.2和 BIK1基因表達上調。此外，經(jīng) SA和 BTH誘導2天后，再接種 Pst DC3000，OsSO1和OsSO2轉基因擬南芥植株菌量低于野生型對照且