玉米亞硫酸氧化酶基因(ZmSO)在二氧化硫脅迫下的功能分析.pdf

1、SO2是我國當(dāng)前的主要大氣污染物，對(duì)玉米等農(nóng)作物的危害很大，直接制約著玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)。實(shí)驗(yàn)室前期已克隆了玉米亞硫酸鹽氧化酶(Zea mays sulfite oxidase，ZmSO)全長(zhǎng)基因，本論文主要進(jìn)行以下三方面的研究：
　　 1.ZmSO在不同脅迫下的表達(dá)分析。通過高溫、低溫、干旱、SO2處理玉米鄭58，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-timePCR)進(jìn)行表達(dá)量上的分析。低溫、高溫脅迫時(shí)ZmSO表達(dá)量降低，起到負(fù)調(diào)控

2、的作用，干旱、SO2處理時(shí)ZmSO表達(dá)量增高，起到正調(diào)控的作用。SO2脅迫時(shí)ZmSO表達(dá)量增高這與參與SO2解毒作用是一致的，但是干旱脅迫下，ZmSO通過何種途徑參與了機(jī)體的保護(hù)，還需要繼續(xù)探討。
　　 2.ZmSO調(diào)控元件分析。生物信息學(xué)分析得到ZmSO啟動(dòng)子(Zea mays sulfite oxidasePromoters ZmSOp)序列，設(shè)計(jì)不同啟動(dòng)子的缺失片段，構(gòu)建帶有GUS：ZmSOP的植物表達(dá)載體。分析ZmSO啟

3、動(dòng)子的功能域，經(jīng)GUS染色得到ZmSO啟動(dòng)子的功能域在100-700bp之間。
　　 3.利用擬南芥AtSO的T-DNA插入突變體，研究ZmSO參與SO2脅迫抗性響應(yīng)的機(jī)制。構(gòu)建了植物表達(dá)載體p35S-GFP-ZmSO，轉(zhuǎn)化野生型擬南芥(Col)和T-DNA插入突變體atso，經(jīng)抗性篩選和分子鑒定，獲得ZmSO/WT、ZmSO/atso轉(zhuǎn)基因株系。SO2脅迫處理后，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系比對(duì)照株傷害程度較輕，表現(xiàn)出較高的抗性，進(jìn)一步的分