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1、金黃色葡萄球菌是人和動(dòng)物感染以及食物中毒中常見的病原菌,隨著抗生素的大量使用,金黃色葡萄球菌的耐藥性也越來(lái)越嚴(yán)重,相繼出現(xiàn)了青霉素耐藥株,甲氧西林耐藥株,萬(wàn)古霉素耐藥株。同時(shí),隨著耐藥菌群的不斷擴(kuò)大,多重耐藥株的相繼出現(xiàn),金黃色葡萄球菌引起感染的治療成為了一個(gè)棘手問題。由于金黃色葡萄球菌的毒力大小與其毒力因子的產(chǎn)量相關(guān),因此,尋找能夠降低其毒力因子產(chǎn)量的藥物對(duì)于治療由金黃色葡萄球菌所引起的疾病具有重要意義。
MIC(Min
2、imal Inhibitory Concentration)的測(cè)定采用倍比稀釋法測(cè)定桂皮醛對(duì)ATCC(American Type Culture Collection)29213以及臨床分離的6株金黃色葡萄球菌的MIC。結(jié)果顯示桂皮醛對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為128mg/l-256mg/l。
抑菌曲線的繪制采用ATCC29213測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)曲線,在細(xì)菌生長(zhǎng)至OD600為0.3時(shí),向其中加入桂皮醛至終濃度為256mg/l、1
3、28mg/l、64mg/l、32mg/l、16mg/l和0mg/l,每隔15min測(cè)定一次細(xì)菌的OD600,繪制生長(zhǎng)曲線。結(jié)果顯示只有256mg/l和128mg/l濃度的桂皮醛能夠顯著抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),其它組的抑制作用很弱。
免疫印跡檢測(cè)采用ATCC29213以及臨床分離株SA3629,按上述方法培養(yǎng)后(去掉256mg/l組),在OD600為2.5時(shí)收集菌液,分離菌體和上清,測(cè)定上清中總蛋白含量,進(jìn)行免疫印跡。結(jié)果表明,12
4、8mg/l和64mg/l濃度的桂皮醛能夠顯著降低α-溶血素以及腸毒素A、B的產(chǎn)量,其他組也同樣能夠降低其產(chǎn)量。
Hla和agrA基因的檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法來(lái)檢測(cè)桂皮醛處理后這兩個(gè)基因表達(dá)的變化情況。結(jié)果表明:4個(gè)亞抑菌濃度組的hla和agrA的表達(dá)量均小于對(duì)照組,且具有濃度依賴性。128mg/l組的hla表達(dá)量只有對(duì)照組的6.33%,agrA的表達(dá)量?jī)H為對(duì)照組的12.11%,而且hla和agrA的表達(dá)變化的差異量不
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