BoLA--A在妊娠奶牛和新生牛中的差異表達(dá)研究.pdf

1、近年來(lái),隨著人們生活水平的不斷提高,人們對(duì)奶制品,特別是牛奶制品的需求日益增加。奶牛是奶產(chǎn)品最為重要的載體,但是其妊娠和分娩,以及新生犢牛的存活率不高,是現(xiàn)代奶牛飼養(yǎng)過程中最突出的問題。在不斷通過改善飼養(yǎng)環(huán)境和提升飼料品質(zhì)的同時(shí),人們開始從分子的角度來(lái)研究如何提高奶牛生產(chǎn)性能和提高新生仔牛的優(yōu)良率。奶牛的妊娠和分娩過程屬于典型的同種半異體免疫過程,主要組織相容性復(fù)合體(MHC)的主要作用就是對(duì)抗原的識(shí)別和應(yīng)答。所以妊娠和分娩必然受到MH

2、C的調(diào)控。
　　牛的MHC被命名為牛白細(xì)胞抗原(bovine leukocyte antigen, BoLA),其基因是高度多態(tài)、緊密連鎖的一個(gè)家族。目前對(duì)于BoLA的功能研究表明,BoLA幾乎分布在所有細(xì)胞表面,是一類轉(zhuǎn)膜蛋白,在抗原的識(shí)別和信號(hào)遞呈傳導(dǎo)、免疫應(yīng)答及其調(diào)控、自體移植物的免疫排斥和抗病毒等方面有著重要的作用。BoLA-A屬于BoLA-Ⅰ類的典型性抗原,但有關(guān)BoLA-A的研究較少。BoLA-A的基因頻率在不同品種間

3、存在著顯著地差異,而且部分品種中缺乏某些等位基因。BoLA-A對(duì)妊娠免疫的影響尚未見報(bào)道。雖然本實(shí)驗(yàn)室對(duì)MICB和BoLA-NC1在妊娠奶牛和新生牛中的差異表達(dá)進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)在奶牛的不同妊娠時(shí)期,其表達(dá)量存在著顯著差異,并認(rèn)為其差異表達(dá)有利于妊娠和分娩,但其對(duì)妊娠免疫調(diào)節(jié)機(jī)理尚未可知。本研究采用熒光定量PCR檢測(cè)并分析BoLA-A在妊娠奶牛和仔牛中的差異表達(dá),以求了解BoLA-A對(duì)奶牛妊娠和分娩的影響。
　　本實(shí)驗(yàn)的樣品來(lái)自上海

4、奶牛研究所的荷斯坦奶牛。分別取孕初期、孕中期、臨產(chǎn)母牛的外周血液樣本和新生仔牛的耳組織樣本以及胎盤的組織樣本,進(jìn)行RNA的提取并反轉(zhuǎn)錄成cDNA;通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)BoLA-A在妊娠奶牛和仔牛中表達(dá)量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),BoLA-A在奶牛妊娠中期的表達(dá)量明顯高于妊娠早期和分娩前期(p<0.01)、在分娩前期和妊娠早期的表達(dá)量無(wú)顯著差異(p>0.05),而在新生仔牛則顯著升高(p<0.01),在后備奶牛和胎盤中幾乎檢測(cè)不到

5、(p<0.001)。結(jié)果推斷,奶牛BoLA-A在奶牛的妊娠、分娩以及新生仔牛中的差異表達(dá)是受到母體免疫機(jī)制調(diào)節(jié)的。在妊娠早期,由于妊娠過程的建立,BoLA-A的表達(dá)量受到胎兒對(duì)于母體免疫反應(yīng)激動(dòng)的影響而低表達(dá)；而BoLA-A在妊娠中期的高表達(dá),則表明隨著胎兒對(duì)母體的適應(yīng)過程,其相互之間的排異逐漸降低。在分娩前BoLA-A的低表達(dá),可能是胎兒與母體之間為分娩而形成的強(qiáng)烈排斥反應(yīng)。在新生胎兒的超高表達(dá)和后備牛中的幾乎零表達(dá)則進(jìn)一步證實(shí)了以上