油茶主要病害拮抗放線菌F10有效成分及菌劑研究.pdf

1、微生物是篩選優(yōu)良生物農(nóng)藥的重要來源之一,放線菌是一種能夠產(chǎn)生多種有效代謝產(chǎn)物,具有良好的抑制植物病原菌生長和促進(jìn)植物生長作用的重要微生物資源。F10菌株是從湖南油茶根際土壤中分離得到的一株對油茶病害拮抗效果較好的放線菌菌株,經(jīng)鑒定為鏈霉菌屬球孢鏈霉菌。室內(nèi)生物測定表明,拮抗放線菌F10及其發(fā)酵液對油茶及其它林木多種病害的抑制率可達(dá)80％以上,是一株很有開發(fā)潛能的廣譜生防菌株。
　　 本論文以油茶主要病害拮抗放線菌F10菌株為材料

2、,對菌株的發(fā)酵工藝、代謝物穩(wěn)定性進(jìn)行了系統(tǒng)研究,對其主要活性代謝產(chǎn)物的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定方面進(jìn)行了初步分析,并對F10生防菌劑的研制及林間應(yīng)用進(jìn)行了探索研究,主要研究結(jié)果如下:
　　 1、放線菌F10發(fā)酵工藝及其穩(wěn)定性研究。為了提高放線菌F10菌株發(fā)酵液抑菌活性物質(zhì)的產(chǎn)量,以放線菌F10發(fā)酵液菌體干重和抑菌活性為主要指標(biāo),研究不同發(fā)酵培養(yǎng)基、不同碳源、氮源等營養(yǎng)因子,以及接種量、裝液量、初始pH值等非營養(yǎng)因子對F10菌株發(fā)酵液生

3、物活性的影響；采用不同的酸堿、熱、紫外線照射及傳代處理,結(jié)果表明:F10菌株最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為:酵母粉0.5％,葡萄糖1％,磷酸二氫鉀0.1％,氯化鈉0.1％,碳酸鈣0.3％,pH自然；最優(yōu)發(fā)酵條件為初始pH=7.0,發(fā)酵時間168h,最適接種量為10％,裝液量100 mL/300m L。F10的熱穩(wěn)定性較差,在pH為12時仍有較好的抑菌活性,在傳代10代后仍有較好的抑菌活性。
　　 2、拮抗放線菌F10有效成分分析。捷克氏八溶劑

4、系統(tǒng)紙層析結(jié)果表明,F10所產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)可能是弱極性的脂溶性物質(zhì),或是含脂溶性成分較多；經(jīng)pH紙層析表明,F10發(fā)酵產(chǎn)物呈中性；HPLC分離純化后,經(jīng)生物活性跟蹤測定,確定抑菌活性最好的組分為H2；經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用分析,確定H2的分子量為402。
　　 3、生防放線菌F10菌劑研制。根據(jù)F10的生物學(xué)性質(zhì),選擇將生防菌株F10制成可濕性粉劑。經(jīng)抑菌活性測定,潤濕性、分散性、懸浮性綜合評價以及貨架期長短測定,最終確定菌劑的最優(yōu)配方

5、為添加40％原粉,38％高嶺土,10％木質(zhì)素磺酸鈉,7％SDS,5％腐植酸；菌劑存放6個月F10的抑菌活性仍為78.8％。
　　 經(jīng)盆栽實驗表明,該菌劑對油茶炭疽病的預(yù)防和治療效果均很良好,500倍的菌劑稀釋液的防治效果可達(dá)80％以上,優(yōu)于對照藥劑多菌靈的防治效果；F10菌劑對油茶葉枯病有一定的防治效果,且治療效果優(yōu)于預(yù)防效果,與對照多菌靈相比,F10菌劑對油茶葉枯病的防治效果呈現(xiàn)明顯優(yōu)勢。通過觀察在油茶苗圃上施用該菌劑的效果,