稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究.pdf

1、從水稻葉片上分離得到兩株生防細菌，將其分別命名為：Af1、Af4。本實驗研究內容主要包括：1.通過培養(yǎng)特征、形態(tài)學特征、生理生化特征以及16SrRNA序列同源性分析對拮抗菌Af1、Af4進行鑒定。2.通過對稻瘟病菌絲生長的抑制實驗、對孢子萌發(fā)的抑制實驗、廣譜抑菌實驗以及不同培養(yǎng)時間、不同濃度、不同pH值的發(fā)酵液對稻瘟病菌的拮抗性測定等實驗對Af1、Af4進行抑菌活性鑒定。3.按照蛋白和脂肽類抗生素分離純化方法定向地對Af1、Af4發(fā)酵液

2、活性物質進行提取，獲得粗提物質，并對粗提物質的生化特性進行研究，最后對脂肽類抗生素合成相關基因進行檢測。4.水稻葉片離體接種實驗，對Af1、Af4進行生物防效測定。
　　 結果表明：1.通過鑒定表明Af1、Af4兩個生防菌株同為枯草芽孢桿菌，兩者的理化特征大致相似，但是Af1能夠產生色素，而Af4不能夠產生色素。2.Af1對稻瘟病菌的抑菌半徑達到22mm,Af4對稻瘟病菌的抑菌半徑達到23mm:Af1和Af4均能抑制稻瘟病孢子的

3、萌發(fā)，當發(fā)酵液濃度為1:1(50％)時，抑制率最高分別可達到88％和92％，當濃度降低到1:124(0.8％)時，抑制率則為16.4％和46％；Af1、Af4具有廣譜抑菌作用，除Af1對水稻紋枯病無作用外，Af1、Af4對稻瘟病菌、稻曲病菌等十種供試病原菌均具有抑制作用；Af1、Af4的發(fā)酵液在不同濃度梯度檢測，均具有抑菌活性；Af1在發(fā)酵液培養(yǎng)5d時抑菌活性最高，而Af4在3d-4d抑菌活性最高，且兩者都耐高溫；兩者均不能耐酸性環(huán)境，

4、適宜在中偏堿性的環(huán)境下生存，Af1在發(fā)酵液pH8時，抑菌活性最高，Af4在pH7時有較高抑菌活性。3.Af1產生多種類型的抗真菌物質，其中包括蛋白質和抗生素，抗生素粗提物對溫度、蛋白酶K不敏感，而蛋白質粗提物對蛋白酶K敏感，對溫度不敏感，并能夠抑制稻瘟病菌黑色素的形成；Af4發(fā)酵液粗提物與脂肽類抗生素一致，對溫度、對蛋白酶K不敏感；從Af1中檢測到fenB、sfp、ituA三個脂肽抗生素合成相關基因，而從Af4中檢測到mycB、fenB