芽孢桿菌對油菜根腫病和稻瘟病的生防潛能研究.pdf

1、芽孢桿菌廣泛存在于自然界中，可產(chǎn)生豐富的次生代謝物質(zhì)，具有極強(qiáng)的抗逆能力和環(huán)境適應(yīng)性，是一類具有實(shí)際用途和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的微生物類群。本研究通過室內(nèi)篩選獲得對油菜根腫病菌(Plasmodiphora brassicae)具有較好抑制效果的生防芽孢桿菌F85和T113，此外還發(fā)現(xiàn)了一株對稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）具有很強(qiáng)拮抗效果的枯草芽孢桿菌BJ-1。本研究以此為材料，分別對生防菌株抑制油菜根腫病和稻瘟病的生防機(jī)理進(jìn)行探討

2、，并綜合評價(jià)生防芽孢桿菌的生防效果。主要研究結(jié)論如下:
　　1.從湖北省當(dāng)陽市油菜根腫病發(fā)生嚴(yán)重田塊的健康油菜根際土壤先后分離微生物菌株667株，其中細(xì)菌323株，真菌253株，放線菌91株;以棉花枯萎病菌及稻瘟菌作為根腫菌指示菌進(jìn)行平板對峙篩選，其中有54株分離菌株抑菌帶寬度大于3mm;通過離體試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有20株生防菌株對根腫菌休眠孢子萌發(fā)抑制率達(dá)30-50％，16株可使根腫菌休眠孢子失活率達(dá)40-55％;通過盆栽防治試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有2

3、株生防菌株F85和T113對根腫病防治效果達(dá)60％以上;兩株生防菌處理后顯著降低根腫菌的根毛侵染率，降低根腫菌休眠孢子初級原質(zhì)團(tuán)的分化，抑制次級游動孢子囊的形成。進(jìn)一步對生防菌株F85和T113進(jìn)行鑒定。生防菌株F85和T113菌體細(xì)胞均呈桿狀，革蘭氏染色反應(yīng)顯示陽性，16S rDNA分子鑒定且系統(tǒng)進(jìn)化樹分析都表明菌株F85和T113屬于Bacillus，利用Biolog微生物快速鑒定系統(tǒng)鑒定結(jié)果也顯示為芽孢桿菌屬，但不能準(zhǔn)確鑒定到種。

4、
　　2.通過傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)，16S rDNA序列分析和Biolog微生物快速鑒定系統(tǒng)將對稻瘟菌具有強(qiáng)拮抗作用的菌株BJ-1鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。枯草芽孢桿菌BJ-1發(fā)酵濾液經(jīng)不同溫度(4-100℃)和不同pH(2-12)處理后對稻瘟菌菌絲的生長抑制效果不變，表明枯草芽孢桿菌BJ-1分泌產(chǎn)生的抑菌成分具有熱穩(wěn)定性及耐強(qiáng)酸、堿能力。平板對峙試驗(yàn)結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌B J-1具有較廣的抑菌譜，對多種

5、植物病原菌菌絲生長均有抑制作用，其中對稻瘟菌的抑菌帶達(dá)22.7mm。顯微觀察發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌BJ-1發(fā)酵濾液(0.5％v/v)處理后的稻瘟菌菌絲尖端膨大畸形，有菌絲溢斷現(xiàn)象。分生孢子經(jīng)發(fā)酵液處理后萌發(fā)不正常，產(chǎn)生的芽管畸形膨大，對附著胞形成具有明顯的抑制作用。在離體葉片上，濃度為1x108CFU/mL的BJ-1菌體懸浮液和濃度為5％的發(fā)酵液和發(fā)酵濾液已可完全防治稻瘟病。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，10％枯草芽孢桿菌BJ-1發(fā)酵液噴霧處理，防治效