燙傷合并海水浸泡后腸道損傷機(jī)制的探討.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文燙傷合并海水浸泡后腸道損傷機(jī)制的探討Exploringthemechanismofintestinalinjuryinscaldedwithimmersioninseawater課題來源：南方醫(yī)院院長基金學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院徐沛王甲漢燒傷外科學(xué)專業(yè)型碩士碩士南方醫(yī)院2014年3月18日廣州摘要二、材料和方法1、實驗動物與分組：成年健康新西蘭兔63只，體重為20～25Kg，雌

2、雄不限，按體重配伍隨機(jī)分為單純燙傷對照組(A組)、燙傷后淡水浸泡組(B組)、燙傷后海水浸泡組(C組)三大組，每大組實驗動物各21只。2、致傷方法：實驗動物經(jīng)3％的硫噴妥鈉按20mg／kg劑量腹腔注射麻醉后，用4％的硫化鈉行背部脫毛，并用清水將脫毛區(qū)域清洗，自然晾干。將各組動物四肢固定，將背部實驗區(qū)域置于95。C恒水浴中12S，造成背部區(qū)域20％TBSA的深二度(病理切片已證實)燙傷創(chuàng)面。致傷后將c組動物頸部以下(模擬傷員落水后情況)浸泡

3、于海水中，B組動物頸部以下浸泡于淡水中，使創(chuàng)面浸泡于水面下，A組動物不做浸泡處理，實驗動物致傷后禁食、禁水，各組分別在浸泡2h、4h、8h三個時間點(diǎn)處死7只，同時從心臟采血和取小腸組織標(biāo)本。3、檢測指標(biāo)及方法：動物處死后從心臟采集4ml靜脈血，用EDTA管收集后，用離心機(jī)離心20分鐘左右(2000—3000轉(zhuǎn)／分)，仔細(xì)收集上清，在20。C冰箱保存；稱取重量，加入一定量的PBS液(PH74)，用勻漿器將標(biāo)本勻漿充分，離心20分鐘左右(2

4、0003000轉(zhuǎn)／分)，仔細(xì)收集上清，分裝后一份待檢測，其余分裝后放入20。C冰箱冷凍備用；再取小腸用PBS液清洗干凈，放入8％的甲醛溶液固定備用。用ELISA法檢測血漿中超氧化物歧化酶(SOD)和脂質(zhì)過氧化物(LPO)水平和腸道組織中PGs含量；用ELISA法檢測血漿中自細(xì)胞介素6(IL6)和腫瘤壞死因子(TNF—ct)含量；光鏡、電鏡觀察小腸的炎癥反應(yīng)情況及結(jié)構(gòu)損傷狀況；采用SP法檢測小腸粘膜細(xì)胞中Bax和Bcl2蛋白的表達(dá)情況。4