蜂蜜中四環(huán)素類(lèi)抗生素的殘留檢測(cè)方法及降解規(guī)律研究.pdf

1、在養(yǎng)蜂生產(chǎn)過(guò)程中，四環(huán)素類(lèi)抗生素（TCs）通常被用來(lái)治療或預(yù)防蜜蜂美洲幼蟲(chóng)腐臭病或歐洲幼蟲(chóng)腐臭病，但同時(shí)也造成了蜂產(chǎn)品中TCs殘留。在蜂蜜的加工儲(chǔ)存過(guò)程中，在合適的溫度、酸度、水環(huán)境下，TCs會(huì)發(fā)生較大程度的差向異構(gòu)化，生成差向異構(gòu)體(ETCs)，ETCs 毒性甚至比藥物原形更強(qiáng)。因此，有必要對(duì)蜂產(chǎn)品中TCs及其降解產(chǎn)物ETCs的進(jìn)行監(jiān)測(cè)，防止TCs對(duì)人體可能造成的傷害。
　　 盡管已經(jīng)有許多測(cè)定TCs的方法，但這些方法都是針對(duì)

2、母體的殘留分析。本研究采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立了同時(shí)測(cè)定蜂蜜樣品中4種TCs和3種ETCs的方法，即四環(huán)素（TC）、強(qiáng)力霉素（DC）、土霉素（OTC）、金霉素（CTC），差向四環(huán)素（ETC）、差向土霉素（EOTC）、差向金霉素（ECTC）。蜂蜜樣品中殘留的藥物用EDTA-McIlvaine緩沖液提取，提取液依次經(jīng)OASIS HLB及羧酸弱陽(yáng)離子柱固相萃取柱富集、凈化、洗脫。洗脫液微孔濾膜過(guò)濾后，通過(guò)流動(dòng)相甲酸水+乙腈梯度分離，電

3、噴霧-串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定。在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下，22min內(nèi)7種藥物（TC、OTC、CTC、DC、ETC、ECTC、EOTC）全部分離并進(jìn)行定性定量。樣品在50μg/kg-200μg/kg添加范圍內(nèi)，回收率在64.9％-91.0％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)不大于9.7％。OTC、EOTC、TC及ETC的檢測(cè)限為1μg/kg，CTC及ECTC、DC的檢測(cè)限為2μg/kg。本方法靈敏、可靠，可用于蜂蜜中七種藥物殘留的同時(shí)檢測(cè)（TC、OTC、C

4、TC、DC、ETC、ECTC、EOTC）。
　　 為了探求蜂蜜貯存和加工過(guò)程中其殘留TCs的代謝規(guī)律，采用上述已建立的方法，考察蜂蜜中影響TCs水解代謝規(guī)律的主要因素，模擬蜂蜜的不同的加工存儲(chǔ)條件獲得不同殘留量樣本，批量分析后，經(jīng)統(tǒng)計(jì)建立降解模型。得出以下結(jié)果：
　　 （1）TCs及ETCs均不穩(wěn)定，光照條件下易降解。而避光保存時(shí)，蜂蜜中殘留TCs的主要降解途徑為水解，水解產(chǎn)物為ETCs，其主要影響因素為環(huán)境溫度(加工、

5、儲(chǔ)存)，時(shí)間（加工、儲(chǔ)存），初始濃度。蜂蜜品種、包裝密封性影響不明顯。
　　 （2）依據(jù)因子設(shè)計(jì)法獲得不同加工條件下的TCs殘留數(shù)據(jù)，建立完全二次水解動(dòng)力學(xué)模型。
　　 （3）依據(jù)回歸正交組合設(shè)計(jì)法獲得不同存儲(chǔ)條件下的TCs殘留數(shù)據(jù)，建立完全二次水解動(dòng)力學(xué)模型。
　　 通過(guò)研究TCs殘留蜂蜜在加工、貯存過(guò)程中的降解規(guī)律，闡明了加工存儲(chǔ)溫度、時(shí)間、初始濃度與TCs及ETCs殘留關(guān)系，對(duì)蜂蜜的生產(chǎn)加工管理，養(yǎng)蜂生產(chǎn)中