動(dòng)物源食品中四環(huán)素類抗生素殘留高效液相色譜檢測方法的研究.pdf

1、四環(huán)素類抗生素是由鏈霉菌產(chǎn)生或經(jīng)半合成制取的一類廣譜抗生素，主要有土霉素（Oxytetracycline，OTC）、四環(huán)素（Tetracyline，TC）、金霉素（Chlortetracylcine，CTC）和多西環(huán)素（Doxycycline，DOTC），由于其廣譜的抗菌活性和藥動(dòng)學(xué)特征而被廣泛用來治療畜禽疾病。 由于一些養(yǎng)殖戶為追求經(jīng)濟(jì)利益，違規(guī)長期超量使用這類抗生素，從而使藥物在動(dòng)物組織中殘留，其直接后果是耐藥菌株逐年增加，

2、不僅使其療效降低，也使得其他抗生素的使用受到了限制。另一方面，藥物在動(dòng)物源食品中殘留超標(biāo)，直接危害著人民的身體健康。因此，為了有效地監(jiān)控四環(huán)素類抗生素的殘留，必需建立起相應(yīng)的檢測監(jiān)控手段和方法。 本論文針對我國動(dòng)物源食品中痕量抗生素殘留分析方法的不足，以土霉素、四環(huán)素、金霉素、多西環(huán)素等4種四環(huán)素類抗生素為主要對象，研究了動(dòng)物組織中4種四環(huán)素類抗生素的提取、凈化處理技術(shù)，建立了準(zhǔn)確測定動(dòng)物源食品（豬肌肉、豬肝臟、豬腎臟、雞肌肉、

3、雞肝臟、雞腎臟、雞蛋）中4種四環(huán)素類抗生素殘留的高效液相色譜法（HPLC）。 樣品前處理過程采用液固提取和固相萃取（SPE）凈化，以pH4.0的Na2EDTA-Mcllvaine緩沖液為提取液，提取動(dòng)物源食品中的四環(huán)素類抗生素，并用硫酸溶液和鎢酸鈉溶液沉淀動(dòng)物組織中蛋白質(zhì)和脂肪，采用OasisHLB柱來分離和凈化動(dòng)物源食品中的四環(huán)素類抗生素。用反相高效液相色譜法在檢測波長350nm的條件下，以0.01mol/L三氟乙酸-乙腈為流

4、動(dòng)相梯度洗脫，測定動(dòng)物源食品中的土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素。 在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，4種四環(huán)素類抗生素的檢測限在豬、雞肌肉和雞蛋組織中均為10μg/kg，在豬、雞肝臟和腎臟組織中均為25μg/kg；4種四環(huán)素類抗生素的定量限在豬、雞肌肉組織中均為20μg/kg，在豬、雞肝臟、腎臟和雞蛋組織中均為50μg/kg。在LOQ～2MRL的添加濃度范圍內(nèi)，4種四環(huán)素類抗生素的平均回收率均為60％～110％，批內(nèi)、批間變異系數(shù)均小于11